张熙 王东伟 曾凡荣 刘爽 马雷 于祥菊

    骨肉瘤是好发于儿童和青少年的骨恶性肿瘤，其特征是骨肿瘤细胞增殖产生类骨样或未成熟骨基质[1]。目前治疗措施包括根治性保肢手术，术前新辅助化疗，术后多药联合化疗[2]。骨肉瘤的治疗和检查都需要采用外科手术，如活检、病理切片和肿瘤切除等，而这些手术通常需要选用全身麻醉。研究表明，麻醉技术改变了分子环境可能会影响到癌细胞的功能，这可能是由于麻醉剂和阿片类药物对疼痛的影响所导致[3]。据报道，麻醉会损伤人体免疫反应，在手术刺激下使癌细胞更易扩散到周围组织和循环内[4]。由此可见，癌细胞的浸润和转移更易发生在外科手术期间。各种麻醉药物用于癌症切除手术中，然而许多麻醉药物对肿瘤的影响仍不清楚。因此，研究麻醉药物对肿瘤的影响对肿瘤治疗，减少肿瘤转移和复发率尤为重要。丙泊酚是一种广泛而常用的静脉麻醉药物。最近，越来越多的证据表明丙泊酚能够在体内和体外影响肿瘤细胞的增殖、扩散和迁移[5，6]。因此，丙泊酚可能成为一种针对肿瘤手术较好的麻醉药物[7]。然而，丙泊酚对骨肉瘤细胞的影响及其机制却鲜有报道。本研究将探寻丙泊酚对人骨肉瘤细胞的影响及其分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养 人骨肉瘤U2OS细胞购于北纳创联生物公司。U2OS细胞37℃快速复苏后，于McCoy’s 5A培养基(含10%胎牛血清)重悬后，置于37℃、5% CO2培养箱中培养，细胞达90%时，0.25%胰酶消化传代。细胞传至4～5代后用于后续实验。

    1.2 实验分组及处理 用DMSO将丙泊酚稀释配制成1 μg/μl的丙泊酚溶液。按随机数字法，分为4组。D组：在4 ml McCoy’s 5A培养基(含10%胎牛血清)中加入DMSO 4μl；P5组：将配制好的丙泊酚溶液20 μl 加入McCoy’s 5A培养基(含10%胎牛血清)中(培养基中丙泊酚浓度为5 μg/ml)；P10组：将配制好的丙泊酚溶液40 μl加入McCoy’s 5A培养基(含10%胎牛血清)中(培养基中丙泊酚浓度为10 μg/ml)；P20组：将配制好的丙泊酚溶液80 μl加入McCoy’s 5A培养基(含10%胎牛血清)中(培养基中丙泊酚浓度为20 μg/ml) ......