老年ICU与非ICU感染凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性及耐药基因鉴定
西林,万古霉素,氧氟沙星,1材料与方法,2结果,3讨论
何雁鸿 廖平明 沈丽莉 刘欧亚 吴腊梅intensive care unit
凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative staphylococcus,CNS)是临床上重要的致病菌之一[1]。临床调查结果显示CNS的感染率呈逐渐升高的趋势,其在革兰阳性菌群中的检出率可达30%以上[2,3],这表明CNS耐药性和治疗困难性的增加。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)报道逐渐增多,其检出率甚至可高达90%[4-6],并且MRCNS菌株药敏结果显示其具有多重耐药性[4,5],因此CNS的耐药性分析提出新的挑战。CNS的感染率在重症患者以及免疫力低下(老年、儿童或者重症患者)、内科病房、接受介入治疗患者中的感染率较高[7-9],据报道处于重症监护病房(ICU)的患者感染CNS以及MRCNS比例更高[6]。绝大多数CNS和MRCNS菌株对万古霉素表现为敏感性,而部分ICU的MRCNS表现为万古霉素耐药性[6],且表现为多重耐药性[4,5]。因此,分析ICU和非ICU科室老年患者CNS在耐药性上的差异,对2组CNS区别治疗具有一定的临床参考价值。
1 材料与方法
1.1 实验仪器与试剂 抗菌纸片和培养基购自英国Oxoid 公司;MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定仪购自德国西门子公司;PCR检测试剂盒、PCR引物、蛋白酶K均购自大连生工有限公司(中国);PCR仪上海宏石SLAN96P;金黄色葡萄球菌(ATCC25923)购自上海市临床检验中心。
1.2 菌株来源及培养 收集2016年6月至2018年6月在本院住院老年患者(年龄≥ 60岁)的临床样本,从血液、痰、脑脊液及其他体液标本的混合物中分离出100株CNS菌株,菌株的分离严格按照《全国检验技术操作规程》第3版标准进行菌株,采用MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定仪鉴定菌株。所有菌株的培养均采用增菌培养法。
1.3 药敏实验 药敏试验采用美国临床实验室标准化委员会方法和判断标准[10]进行Kirby-Bauer纸片扩散法实验,检测菌株对万古霉素、替考拉宁、青霉素、氯霉素、克林霉素、庆大霉素、复方新诺明、左氧氟沙星、氨苄西林、红霉素、四环素、头孢唑啉 ......
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