常亮 徐璐 刘素云 郭炳彦 金鑫 贾妍 李拥军

    据不完全统计，全球每年死于心血管疾病和卒中的人数约占所有死亡的1/3。如何通过有效的手段降低心血管疾病发病率与病死率，已经成为重大公共卫生问题[1]。病理性心肌肥大是心血管疾病发病率和病死率增加的独立性危险因素，可导致心肌重构，心肌收缩功能下降，在细胞层面主要表现为心肌细胞表面积增大，伴有细胞凋亡、心肌纤维化等不可逆过程，与心脏猝死、冠心病和心力衰竭关系密切。其具体病理机制仍有待进一步阐明。近年来有大量研究报道，炎症在循环系统疾病中发挥重要作用，多种效应的炎性细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-10(IL-10)可诱导心肌肥大反应[2]。内脂素最初是从活化的外周血淋巴细胞中分离出来的，与B淋巴细胞的成熟相关，又称前B细胞克隆增强因子。内脂素不仅是脂肪细胞特异的蛋白，还是一个重要的前炎性因子。已有报道显示，肥胖、代谢综合征、糖尿病、高血压等疾病患者的血浆内脂素水平升高，且与促炎因子水平密切相关，体外实验证实，胞外内脂素可通过Nampt活性促进血管炎症[3]。闫伟等[4]研究认为，内脂素在肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病等代谢性疾病中充当一种炎性标记物及致内膜损伤性物质，还参与心血管疾病的细胞增殖、单核巨噬细胞激活与招募、血管炎症及细胞外基质重构的病理过程，参与冠心病的发病过程，并与冠状动脉病变严重程度密切相关[4]。本研究前期表明，心肌细胞内脂素mRNA和蛋白表达在Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大中的增加，并呈剂量和时间依赖性的增加[5]。炎性细胞因子级联反应在心力衰竭、动脉粥样硬化的发生发展具有重要作用。目前，笔者尚未见有关内脂素与心肌细胞炎性反应在心肌肥大中的研究。本实验拟通过体外实验观察外源性内脂素干预下的小鼠心肌细胞中炎性因子的变化，结果如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 清洁级2～3 d龄SD乳鼠，雌雄不限，河北医科大学实验动物中心提供。

    1.2 主要试剂 多聚甲醛固定液、辛伐他汀，美国Sigma公司产品；多聚左旋赖氨酸，购自美国AMRESCO公司；重组大鼠内脂素为Abcam公司；NF-κB抑制剂SN50、ROCK抑制剂Y27632、Sirtinol，均为美国santa cruz公司产品；SP免疫组化试剂盒，美国Zymed Laboratories公司产品；DMEM培养基、Ⅱ型胶原酶干粉，为GIBCO公司产品；D-Hanks平衡盐溶液、胎牛血清，购自北京索来宝科技有限公司；胰蛋白酶干粉，为美国Hyclone公司产品；双抗培养基，美国英杰生命技术有限公司产品；5-溴脱尿苷、ROCK2兔抗鼠一抗、RhoA兔抗鼠一抗、IκBα兔抗鼠一抗、p65兔抗鼠一抗 ......