李宇 刘健磊 郭爱林 刘宗泓

    据WHO统计左心室肥厚(LVH)已经成为心血管疾病患者病死率的一个重要的预测因素及独立的危险因素，从而越来越受到大家的重视[1]。LVH是由心肌细胞大小增加引起的左心室形态的生长变化。LVH既可能是生理适应结果，也可能是继发于遗传性疾病或左心室超负荷的病理状态。病理性LVH是一种代偿性现象，并逐渐发展为左心室功能障碍甚至心力衰竭。有文献报道合并高血压使急性心肌梗死、充血性心力衰竭、猝死及其他心血管事件的发生率增加6～8倍[2]。压力超负荷是诱导心肌肥厚，心力衰竭的主要原因之一[3]。无论病因如何，心肌纤维化是心脏衰竭发病机制的重要决定因素。心脏纤维化是指胶原蛋白过多沉积在心脏细胞外基质(ECM)中，从而损害心脏的收缩和舒张功能[4]。在肥厚的心肌中，胶原蛋白通常沉积在小动脉的细胞间质和周围空间中[5]。这种胶原蛋白沉积既可能是区域性的，也可能分布更为分散[6-9]。同时肥厚型心肌细胞患者的磁共振成像(MRI)检测显示，心肌纤维化分布具有异质性[10]。纤维化区域与心肌壁增厚呈正相关，与区域收缩呈负相关[11]。虽然目前针对压力超负荷引起LVH形成的机制等研究较多，但是针对毛细血管密度与LVH的形成之间的关系却少有人研究。本实验通过压力超负荷诱发的LVH大鼠模型，探讨相同的压力超负荷下，左心室壁中各室壁心肌纤维形成能力不同，此种不同是否与毛细血管分布水平有关，从而探讨毛细血管密度是否是影响心室肥厚的一种因素，从而为压力超负荷诱发的LVH的早期诊断和预防提供了新的干预靶点。

    1 材料与方法

    1.1 一般资料

    1.1.1 实验动物：6～8周大的雄性SD大鼠40只，许可证号：SCXK(京)2016-0006。在标准实验室条件下将大鼠圈养在聚丙烯笼中，大鼠可以随意进食标准饮食和纯净水。

    1.1.2 实验仪器与试剂：复合凝胶(OCT，Leica，Germany公司)；天狼星红染色试剂盒(Solarbio公司)；WGA凝集素(WGA，Sigma公司)；山羊抗大鼠CD31抗体(R&D，AF3628)；小鼠抗大鼠波形蛋白抗体(Abcam，ab8978)；兔抗大鼠胶原蛋白I(Abcam，ab34710)抗体；Alexa Fluor 488驴抗山羊二抗(Thermo Fisher，A-11055)；Alexa Fluor 488山羊抗小鼠二抗(Thermo Fisher，A-11001)；辣根过氧化物酶偶联的抗兔二抗(Cell Signaling Technology，8114)；4’ ......