罗丽坤 吴建江 张丽

    脊髓损伤(SCI)是一种中枢神经系统损伤，临床表现主要为四肢瘫、截瘫等症状，具有预后差、致残率高、致死率高等特点[1]。目前临床治疗SCI主要有手术、药物、康复理疗等方法，改善受损脊髓的缺血缺氧状态，抑制神经元坏死，修复受损神经元功能，但因脊髓神经细胞不能自我修复，因此临床疗效不佳[2]。随着组织工程技术的发展，研究者发现骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对SCI有较好的疗效，BMSCs作为一类特殊的干细胞，具有自我更新的能力，且在一定条件下可诱导分化为星形胶质细胞、神经元、少突胶质细胞等多种神经细胞，可恢复SCI受损神经功能，是治疗脊髓损伤的一种新方法[3,4]。丙泊酚作为临床常用的麻醉药物，具有抗氧化活性，能清除脊髓组织自由基，抑制氧化应激反应，改善神经功能，对治疗SCI具有一定的作用[5,6]，另外联合BMSCs移植可进一步改善大鼠SCI症状，增强BMSCs的疗效[7]，但其作用机制目前并不清楚。ERK1/2通路在SCI中起到重要的调节作用，通过抑制其活性，可促进损伤脊髓电生理功能的恢复，修复脊髓受损功能[8]。研究发现，ERK1/2通路参与介导BMSCs的分化[9]，且丙泊酚可通过抑制p-ERK1/2降低大鼠脑缺血再灌注损伤[10]，因此，可推测ERK1/2通路可能是丙泊酚联合BMSCs治疗SCI的作用靶点，本文通过建立SCI大鼠模型，对丙泊酚联合BMSC移植修复对SCI大鼠运动功能及ERK1/2通路的影响进行研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物:清洁级SD大鼠(动物合格证编号：11401300035796，北京华阜康生物科技股份有限公司)，雄性，在清洁安静的环境下饲养，自由饮水、饮食，定期清理消毒鼠笼、更换垫料，温度保持在25℃左右，湿度保持在60%左右，保持通风良好，自然光照。

    1.1.2 试剂与仪器:丙泊酚注射液(国药准字：J20040122，北京费森尤斯卡比医药有限公司)；DMEM高糖培养基(货号：L0104-100，上海微科生物技术有限公司)；胎牛血清、PBS缓冲液、胰蛋白酶-EDTA消化液、青链霉素混合液(货号分别为：11011-8611、P1022、T1300、P1400，Solarbio公司)；SOD检测试剂盒(货号：IC-SOD-Ra，上海钰博生物科技有限公司)；MDA检测试剂盒(货号：xy-30182，上海信裕生物科技有限公司)；亲和素-生物素-过氧化物酶复合物染色法(Avidin-biotin-peroxidase complex ......