杜雨蒙 刘林夕 褚雨

    胃癌(gastric cancer)是世界上所有癌症中导致死亡的第二大原因，在2018年造成全世界782 685例死亡[1,2]。目前，胃癌的发病率明显增加，每年约有1 033 701例新发病例，其中中国的胃癌风险最高，占世界新发病例的43%，尽管在过去几十年中诊断和治疗方法有所改善，但胃癌的预后仍然很差[3,4]。 因胃癌确诊多数已到晚期，在临床治疗中需要开发新的高效、低毒、耐药的抗癌药物。中药成为晚期癌症患者的首选药物，其中多糖类药物已在临床治疗晚期癌症或放化疗抗性癌症中占据重要地位。青果(canarii fructus)是橄榄科植物的干燥果实，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤的功效[5]。近期，有研究报道，青果粗多糖可抑制宫颈癌细胞的增殖[6]，但是其多结直肠癌细胞的生物学作用及机制尚未清楚。本研究拟以胃癌细胞MKN45为研究对象，检测青果多糖组分CFW对MKN45细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响，揭示其机制与抑制ERBB信号通路相关，为青果多糖组分CFW在癌症中的治疗价值的开发奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人胃癌细胞MKN45购自ATCC；青果购自四川新荷花中药饮片有限公司；DMEM培养基、胎牛血清、MTT、胰蛋白酶均购自美国Sellect公司；LipofectamineTM2000、BCA蛋白定量试剂盒、逆转录试剂盒购自大连Takara公司；Annexin V- FITC/PI凋亡检测试剂盒购自北京索莱宝公司；PVDF膜购自德国罗氏诊断有限公司； SDS-PAGE 试剂盒、ECL发光液和RIPA蛋白裂解液均购自碧云天生物技术公司；Matrigel基质胶、Transwell小室购自美国Coming公司；凝胶成像分析仪购自柯达公司；半干转膜仪购自美国BIO-RAD公司；ABI 7500型实时荧光定量PCR系统购自美国ABI公司；Genesys 10紫外分光光度计购自美国Thermo公司；PCR 仪购自美国BIO-RAD公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养:将人胃癌细胞MKN45用含10%胎牛血清的DMEM培养基 ......