常帅 徐晓琴 相华 孟伟 郑海燕 张辉 荣景 周洪 夏菊梅

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)为糖尿病(diabetes mellitus，DM)主要慢性并发症之一，国际糖尿病联盟称，全世界死亡人数中约有10.7%是DM所造成的，目前全世界范围内患DM的成人数量高达4.25亿[1]。2013年国内一项报道显示，我国成人DM患病率是10.4%，其中20%～40%患者发生了DN[2]。当前，伴随人们生活水平的提升，国内DM患者逐渐呈现出年轻化趋势，临床对防治DN已刻不容缓。DN病因病机异常复杂，西医多进行降压、降糖等综合疗法，而中医由整体出发，天人合一作为基础理论，经过中药的多途径、多靶点和多部位对全身内分泌代谢进行调节[3,4]。雷公藤多苷为单味中药雷公藤的提取物，具有“活血通络、祛风除湿”等功效[5]，雷公藤多苷对于前期DN患者的临床疗效已得到认可，但关于其治疗机制的相关研究笔者所见较少。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)为丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员之一，DN病理改变和PI3K/Akt/mTOR信号通路活性联系紧密，调控肾小球固有细胞、系膜细胞等增殖与生长，对介导细胞外基质蛋白合成等有重要影响[6,7]。因此，本研究分析雷公藤多苷通过Akt/mTOR信号通路对DN小鼠肾损伤影响，为临床患者治疗提供一些实验室依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验小鼠 选取SPF级C57 BL/6 J小鼠75只，购自北京维通利华实验动物公司，许可证号：SCXK(京)：2019-31，体重15～25 g，平均(19.20±3.14)g。常规饲养1周后开始实验，小鼠分笼饲养，每个笼内5只，室温维持22℃～26℃，相对湿度55%～65%，昼夜循环，保持12 h光照，小鼠灌胃、添加饲料及换水均有专人进行。

    1.2 实验药物、试剂与仪器 药物、试剂：雷公藤多苷(江苏泰州美通制药公司)，链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司)，糖化血清蛋白、尿蛋白、血尿素氮及血清肌酐试剂盒(购自南京建生物研究所)，兔抗鼠p-mTOR多克隆抗体、兔抗鼠mTOR多克隆抗体(美国bioworld公司)，兔抗鼠p-Akt多克隆抗体、兔抗鼠Akt多克隆抗体(美国SAB公司)。仪器：冷冻离心机(型号：5430R，德国Eppendof公司)，台式离心机(型号：TDL-40B，上海安亭科学仪器)，电泳仪(型号：164-5051 ......