窦越超 王雪飞

    糖尿病性骨质疏松症(diabetes osteoporosis，DOP)是糖尿病的一种并发症，是由于血糖升高导致骨组织代谢紊乱而引起的骨组织结构破坏、骨量减少、骨脆性增加、易引发骨折为特征的全身性骨骼疾病，严重影响患者生活质量，目前尚无有效药物治疗DOP，亟需开发新的治疗药物和方法[1]。成骨细胞是促进骨形成的主要功能细胞，成骨细胞凋亡是引起骨质疏松的重要原因，研究成骨细胞的凋亡机制对预防和治疗骨质疏松症具有重要意义[2]。长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)参与了多种生物学过程，与骨质疏松也密切相关，可作为骨质疏松(osteoporosis，OP)骨代谢过程中的生物标志物，为OP诊断、治疗及判断预后提供新的靶标[3]。有研究报道rs3820282是染色体1p36.12上具有最强子宫内膜异位症风险关联的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)，通过细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42，CDC42)和LINC00339的反向调节起作用[4]。染色体1p36.12的骨质疏松症风险SNP rs6426749-G等位基因可以提高LINC00339的表达，而LINC00339的下调可促进骨代谢关键调节因子CDC42的表达，表明LINC00339可能与骨质疏松症有关[5]。但目前笔者未发现LINC00339对成骨细胞生物行为的影响及其机制还未有研究。研究发现miR-195-5p通过靶向成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2，FGF2)抑制子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭和迁移并促进细胞凋亡，其可作为子宫内膜癌的治疗靶点[6]。上调miR-195-5p通过降低其靶基因骨形态发生蛋白受体-1α(bone morphogenetic protein receptor-1α，Bmpr1α)的表达可降低骨髓间充质干细胞的成脂分化，改善骨质疏松症状[7]。本实验旨在研究LINC00339和miR-195-5p对成骨细胞增殖、凋亡的影响及LINC00339是否通过调控miR-195-5p影响成骨细胞的增殖和凋亡。为骨质疏松的预防和治疗提供新思路和新靶点。

    1 材料与方法

    1.1 材料 成骨细胞hFOB1.19购自上海通派生物科技有限公司；DMEM培养基、胎牛血清购自美国Sigma公司；胰蛋白酶购自美国Gibco公司；Lipofectamine TM 2000转染试剂盒、RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒购自美国Invitrogen公司；二辛可宁酸(BCA)试剂盒、聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride ......