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编号:276374
丙泊酚激活PI3K/Akt/mTOR通路对脑缺血大鼠的神经保护作用
http://www.100md.com 2021年4月12日 河北医药 2021年第4期
脑组织,1材料与方法,2结果,3讨论
     吴丽玉 赵立福 王茜 刘廷文

    缺血性脑卒中是临床常见的脑血管疾病患者预后差,大多数会因脑损伤而引发偏瘫、行走障碍等后遗症[1,2]。丙泊酚作为一种静脉麻醉药,广泛用于外科手术麻醉,可使重症监护室患者镇静。危重病症及重大手术患者常伴有脑缺血并发症,而丙泊酚可通过抑制琥珀酸积累来减轻局灶性脑缺血再灌注导致的氧化应激反应[3];并可改善神经功能缺损及认知功能障碍,促进大脑功能恢复,起到神经保护作用[4],但其作用机制目前尚未清楚。研究表明,PI3K/Akt/mTOR通路介导脑缺血再灌注后病理损伤过程,是保护缺血性脑损伤的作用靶点,激活该通路,可减轻新生儿脑缺氧缺血性脑损伤[5],并修复卒中后大鼠神经功能,提供神经保护[6],而丙泊酚可通过激活PI3K/Akt通路来抑制大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡,发挥肺保护作用[7],因此推测丙泊酚可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路对脑缺血大鼠发挥神经保护作用,本文通过建立脑缺血大鼠模型,对此进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 动物 SD大鼠购自由广东省医学实验动物中心,生产许可证号:SCXK(粤)2016-0002,动物质量合格证号:44007200021086,SPF清洁级,雄性,体重(240±20)g。所有大鼠在本院动物房中饲养,保持环境清洁、安静、通风良好,温度保持约22℃~25℃,相对湿度保持约50%~60%,12 h/12 h间断照明,大鼠自由进食、饮水,定期更换垫料、添加饲料及饮用水。

    1.2 主要试剂及仪器 丙泊酚注射液(国药准字:J20040122),北京费森尤斯卡比医药有限公司;LY294002(HY-10108),美国MCE公司;三苯基氯化四氮唑(2、3、5-Triphenyte-trazoliumchloride,TTC)(298964),美国Amresco公司;大鼠中枢神经特异性蛋白(specific protein 100β,S100β)ELISA试剂盒(YS04063B),上海雅吉生物科技有限公司;大鼠神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)ELISA试剂盒(SBJ-R0081),南京森贝伽生物科技有限公司;大鼠IL-6 ELISA试剂盒(ab100772)、大鼠TNF-α ELISA试剂盒(ab100785)、兔源GAPDH一抗(ab181602)、兔源PI3K一抗(ab151549)、兔源p-PI3K一抗(ab138364)、兔源AKT一抗(ab179463)、兔源p-AKT一抗(ab38449)、兔源mTOR一抗(ab2732)、兔源p-mTOR一抗(ab84400)、羊抗兔二抗(ab150077) ......

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