刘佳

    滋养细胞来自胚胎外滋养层，具有滋养功能，妊娠早期滋养细胞侵入母体蜕膜间质与血管，使螺旋动脉发生重铸，保证胎盘正常形成与妊娠进展[1]。滋养细胞与恶性肿瘤细胞有诸多相似性，高度增殖、侵袭迁移及逃避免疫系统攻击，在流产、先兆子痫等妊娠病理情况中发挥重要作用[2]。丙泊酚是临床常用麻醉剂，有研究显示，丙泊酚可降低流产率，逆转流产胎盘，蜕膜结构的病理改变，可能对滋养细胞的恶性增殖发挥抑制作用[3,4]。磷脂酰肌醇激酶(phosphatidylinositol kinase，PI3K)是生长因子激活的受体酪氨酸激酶和G蛋白受体重要的下游信号成分。研究显示多种母胎界面的生长因子可激活PI3K/蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)通路促进细胞增殖、侵袭过程[5,6]，丙泊酚是否通过PI3K/Akt信号通路对滋养细胞增殖、侵袭功能进行调控。本研究通过体外培养滋养细胞系JEG-3，检测丙泊酚对JEG-3细胞增殖、侵袭的影响，并使用PI3K抑制剂LY294002进行实验，旨在探讨丙泊酚对滋养细胞恶性增殖的调控作用，为丙泊酚的合理利用提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 细胞株：人细胞外滋养细胞株JEG-3购自中国科学院上海生物研究所。主要试剂及来源：12%胎牛血清、胰酶、DMEM/F12培养基购自上海语纯生物科技有限公司；CCK8相关试剂购自上海翊圣生物有限公司；蛋白提取试剂盒、BCA试剂盒购自美国sigma公司；鼠抗人增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)、金属基质蛋白酶2(metallopro-teinase 2，MMP-2)、金属基质蛋白酶9(metalloproteinase 9，MMP-9)、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、GAPDH一抗及辣根过氧化物酶标记羊抗鼠免疫球蛋白购自上海强耀生物科技有限公司；Transwell相关试剂购自美国BD公司；ECL化学发光剂试剂盒购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；核酸蛋白测定仪及凝胶成像仪购自德国Eppendorf公司；CO2培养箱购自上海丙林电子科技有限公司 ......