曹洪庆 刘广民

    胰腺癌是一种高度恶性的消化道肿瘤，胰腺癌的5年生存率为7%～8%，近年来胰腺癌发病率和死亡率逐年上升[1]。因此，对于胰腺癌进行早期诊断，采取积极有效的干预措施阻止胰腺癌的进展是提高患者生存率的关键所在。长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)是长度>200个核苷酸的非编码RNA，没有编码蛋白的功能。研究发现,lncRNA在调节细胞增殖、凋亡、侵袭及血管生成中发挥着重要功能[1]。越来越多的研究表明,lncRNA参与肿瘤细胞的形成和发展。例如,在肺腺癌、前列腺癌、白血病、结肠癌和肝癌组织中均发现lncRNA差异表达[2]。研究发现，lncRNA MALAT1通过靶向调控miR-204表达诱导胰腺癌细胞G2/M细胞周期停滞、促进细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力[3]。LncRNA-PVT1通过调节miR-448促进胰腺癌细胞的增殖和迁移[4]。LncRNA BCAR4在胰腺癌细胞中表达升高,LncRNA BCAR4的高表达可促进胰腺癌细胞增殖，抑制凋亡[5]。有研究报道lncRNA MAP3K14在胰腺癌组织中下调表达，其可能与胰腺癌的发生发展有关[6]，另外MAP3K14对胰腺癌细胞的生物学行为的影响及具体机制尚不清楚。目前研究已证实丝裂原活化蛋白激酶家族MAPK参与调控肿瘤的发生发展，其中已证明MAP3K10可通过上调gli-1和gli-2的表达促进胰腺癌细胞增殖[7]，MAP3K14可抑制乳腺癌细胞生长和侵袭[8]。因此，本研究就MAP3K14对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响以及是否通过调节miR-17-5p来影响胰腺癌细胞的增殖凋亡进行研究,以期为今后胰腺癌的治疗提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料 RPMI 1640培养基购自美国 Gibco，胎牛血清购于Gibco，Trizol试剂盒购于TakaRA,lncRNA 提取试剂、荧光定量RT-PCR 试剂盒购于Qiagen,试剂 LipofectamineTM 2000、OTI-MEM均购自Invitrogen。miR-MAP3K14引物合成自上海生工生物公司，双荧光素酶报告基因检测试剂盒购于美国Promega，pcDNA3.1、pcDNA3.1-MAP3K14、pcDNA3.1-MAP3K14+miR-NC、pcDNA3.1-MAP3K14+miR-17-5p购自武汉淼灵生物科技有限公司，CCK-8试剂购自美国 Amresco 公司。

    1.2 标本收集 55例胰腺癌组织及25例癌旁组织标本，来源于医院手术治疗的患者 ......