帅欢 唐继军 凌利平

    糖尿病肾病是糖尿病中常见的一种微血管并发症，且常伴随炎症状态。严重时可直接导致肾功能不全，是导致患者残疾和死亡的重要因素之一[1]。因此早期的预防和治疗是减少和避免糖尿病肾病发生的关键。有研究表明，脑信号蛋白3A的表达能够作为诊断糖尿病肾病的发生及蛋白尿严重程度的重要指标[2]。脑信号蛋白3A是能够通过调节神经生长导向轴突生长方向，随着更多的研究证明，其还能够参与细胞的迁移、肿瘤生长和免疫反应等多种生物学功能[3]。但目前笔者所见临床上对脑信号蛋白3A于糖尿病肾病影响机制研究较少，因此在本文研究中为寻找治疗糖尿病肾病的方向，建立糖尿病肾病模型大鼠，通过抑制脑信号蛋白3A的表达，观察下调脑信号蛋白3A对糖尿病肾病大鼠的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 研究动物：选取SPF级40只SD健康大鼠(北京维通利华实验动物有限公司，合格证号：SCXK20060009)，由基尔顿生物科技(上海)有限公司提供，鼠龄(3.5±0.2)个月，体重(219.7±8.5)g。大鼠均养殖在干净笼子里，室温(22.1±1.8)℃，相对湿度35%～40%，每天光照12 h，喂饮纯净水，饲养时间1周。本实验均获得医院伦理委员会批准。

    1.1.2 主要试剂：大鼠抗小鼠TGF-β1抗体(上海一基实业有限公司)；小鼠抗大鼠α-SMA抗体(沈阳万类生物科技有限公司)；兔抗大鼠骨形成蛋的(BMP7)抗体、E-Cadherin抗体(武汉菲恩生物科技有限公司)；兔抗小鼠Smad6抗体(上海恒斐生物科技有限公司)；24 h尿微蛋白 ELISA试剂盒(南京卡米洛生物工程有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 分组、建模及给药:随机选取40只大鼠中10只作为正常组，剩余大鼠参照陈卫东等[4]研究实验中糖尿病肾病模型大鼠建立方法建立模型，30只大鼠均通过高糖高脂饲料喂养4周后，进行腹腔注射，一次性注射55 mg/kg的链脲佐菌素，正常组给予普通饲料喂养，腹腔注射枸椽酸盐缓冲液，72 h后使用血糖仪测定血糖，血糖≥16.7 mmol/L，则表示糖尿病模型建造成功，24 h尿量大于造模前50%且24 h尿蛋白排泄率>30 mg/24 h，表示糖尿病肾病模型制备成功。将建模成功的30只糖尿病肾病模型大鼠随机分为模型组、上调组、下调组 ......