王丹 陈红

    甲状腺癌是内分泌系统中最常见的恶性肿瘤之一，在过去的几十年中，其发病率在许多国家迅速增加[1]。尽管大多数甲状腺癌患者的预后良好，但很大一部分患者在10年内出现局部复发或远处转移[2]。因此，阐明甲状腺癌的发生和发展的分子机制极其重要，这将有助于为甲状腺癌的治疗提供有希望的靶点，对预防甲状腺癌的复发和转移至关重要。作为小型非编码RNA的微小RNA(microRNA，miRNA)，由于其在基因或信号通路调控中的重要作用，几十年来一直是学者研究的重点。miRNA的表达具有明显的组织特异性，在肿瘤发生中起重要作用，因此miRNA被认为是癌症良好的生物标志物[3]。据报道，miR-9在人类多种癌症中具有多种表达模式，并且在不同类型的癌症中发挥不同的作用[4,5]。有研究发现，miR-9在复发的甲状腺癌组织中的表达显著低于未复发的患者，提示miR-9可作为甲状腺癌复发的预后生物标志物[6]。但miR-9在甲状腺癌中的作用及其相关机制尚未可知。Wnt/β-catenin信号在癌细胞中被组成性激活，参与多种恶性肿瘤的发生和转移[7,8]。研究表明，miR-9通过调控Wnt/β-catenin信号途径来调节来抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖[9]。然而，目前尚不清楚miR-9是否通过调控Wnt/β-catenin信号通路在甲状腺癌中发挥作用。因此，本实验旨在探究miR-9对甲状腺癌细胞侵袭和迁移的影响及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用，以期为甲状腺癌的治疗提供新的作用靶点。

    1 材料与方法

    1.1 细胞系与主要试剂 人正常甲状腺上皮细胞系Nthyori3-1和人甲状腺癌细胞系TPC-1、MDA-T32及SW579(美国ATCC)；PRIM-1640培养基、胎牛血清(美国Gibco公司)；胰蛋白酶、青霉素和链霉素(美国HyClone公司)；miR-9 mimics及mimis control(广州市锐博生物科技有限公司)；TRIzol试剂、脂质体Lipofectamine 2000转染试剂(美国Invitogen公司)；逆转录试剂盒(大连宝生物工程有限公司)；SYBR Green Master Mix检测试剂盒(赛默飞世尔科技有限公司)；Transwell小室、Matrigel基质胶(美国BD公司)；细胞裂解液、BCA蛋白定量检测试剂盒、ECL发光试剂(上海碧云天生物科技研究所)；兔抗人MMP-2、MMP-9、β-catenin和c-Myc一抗及辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗(美国CST公司) ......