孙彦申 张跃

    前列腺癌是临床常见恶性肿瘤之一，调查显示我国前列腺癌发病率逐年上升，前列腺癌发生发展与致癌基因、抑癌基因等异常表达密切相关[1,2]。微小RNA(microRNA，miRNA)可通过与靶mRNA结合从而参与癌症、心血管疾病等多种疾病发生过程[3,4]。因而探究前列腺癌发生发展的原因及引起的机制对提高治疗效果具有重要意义。研究表明，微小RNA-1260a(microRNA-1260a，miR-1260a)在前列腺患者中高表达[5]。但miR-1260a对前列腺癌细胞生物学行为的影响尚未见报道。TargetScan预测显示亮氨酸拉链蛋白(fasciculation and elongation protein zeta-1，FEZ1)可能是miR-1260a的靶基因，研究表明，miR-1260a是一个抑癌基因并可抑制肿瘤增殖[6]。研究报道指出，FEZ1过表达可诱导前列腺癌细胞凋亡及抑制增殖[7]。但miR-1260a是否通过调控FEZ1的表达影响前列腺癌细胞生物学行为尚未可知。本研究主要探讨miR-1260a对前列腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及机制，分析其对FEZ1的调控作用，以期为前列腺癌的分子诊断及靶向治疗提供新的治疗方向。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2017年6月至2019年1月于本院诊治的前列腺癌患者46例为研究对象，患者均经病理证实为前列腺癌，年龄50～70岁，平均年龄(65.25±5.64)岁，所有患者接受手术治疗，术前均未接受放疗或化疗，本研究经本院伦理委员会批准，所有患者知情且签署同意书。术中切除前列腺癌组织及其癌旁组织，放入液氮中保存，术后转移至-80℃超低温冰箱保存。

    1.2 材料与试剂 前列腺癌DU145细胞购自美国ATCC细胞库。杜氏改良培养基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium，DMEM)、胰蛋白酶、胎牛血清均购自美国Gibco公司；Lipofectamine2000购自美国Thermo Fisher Scientific公司；miR-1260a特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-1260a)及其阴性对照(anti-miR-NC)、miR-1260a模拟物(mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、FEZ1小干扰RNA(si-FEZ1)、无意义阴性序列(si-NC)均购自广州锐博生物科技有限公司；Trizol、反转录试剂盒、SYBR Green试剂盒购自日本TaKaRa公司；甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl tetrazolium ......