范瑷霞

    胃癌是临床常见恶性肿瘤之一，我国胃癌发病率与死亡率较高，目前临床主要采用手术的方式治疗胃癌，但麻醉药物等均可影响治疗效果[1,2]。研究表明曲马多(Tramadol)可通过调控免疫因子表达从而影响胃癌患者的免疫功能[3,4]。曲马多可减轻肿瘤患者中前炎因子水平而抑制应激反应[5]。但曲马多对胃癌细胞生物学行为的影响尚未完全阐明。研究表明微小RNA-574-5p(microRNA-574-5p，miR-574-5p)在胃癌组织中高表达，其表达水平与肿瘤大小、TNM分期等临床参数密切相关[6]。研究表明miR-574-5p在多种恶性肿瘤中高表达，还可促进宫颈癌细胞增殖及抑制其凋亡[7,8]。但曲马多是否可通过调控miR-574-5p表达而发挥作用尚未可知。本研究以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象，观察曲马多对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响，及其对miR-574-5p表达的调控作用，进一步探讨其内在作用机制，旨在为曲马多用于治疗胃癌提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 曲马多购自德国格兰泰有限公司；胃癌SGC-7901细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司。miR-574-5p inhibitor、Inhibitor control、miR-574-5p mimic、mimic control购自广州锐博生物科技有限公司；RPMI 1640培养基、胎牛血清购自上海远慕生物科技有限公司；青霉素与链霉素购自上海信帆生物科技有限公司；Lipofectamine2000购自上海润成生物科技有限公司；MTT购自北京博润莱特科技有限公司；细胞凋亡检测试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司；RIPA裂解液购自南京森贝咖生物科技有限公司；Trizol试剂购自美国Thermo Fisher公司；反转录与实时荧光定量PCR试剂盒均购自大连宝生物工程有限公司；B淋巴细胞瘤2(Bcl2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)单克隆抗体购自上海钰博生物科技有限公司；HRP标记的IgG二抗购自武汉艾美捷科技有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 实验处理与分组:胃癌SGC-7901细胞贴壁培养于RPMI 1640完全培养基 ......