王艳 颜治 詹洮

    心肌细胞凋亡是多种心血管系统疾病发生的重要原因，其也是心肌炎、心肌梗死等心脏相关疾病进展程度的评价指标[1]。脓毒症心脏损伤是常见的心血管系统疾病，脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分之一，也是脓毒症发生的诱导因子[2]。miRNA是近些年来备受青睐的分子生物学标记物，其不仅是评估心血管系统疾病患者预后情况、进展程度的重要指标，也是疾病治疗的潜在靶点[3]。研究显示，miRNA在血管内皮细胞、心肌细胞、平滑肌细胞等各种类型细胞中表达，并且与细胞正常生理功能发挥有关[4]。miR-711在人体内脾脏、肝脏、心脏、肾脏等组织中表达，参与急性肝损伤、肿瘤、心肌纤维化等疾病发生[5]。研究报道显示，miR-711在心肌缺血再灌注损伤、心肌梗死发生时表达上调，并且下调miR-711表达可以减少缺氧诱导的心肌细胞凋亡，miR-711可能是一个心肌细胞促损伤因子[6,7]。目前对miR-711在脓毒症心肌细胞凋亡中的作用及调控机制还不明确。本次实验以心肌细胞H9c2为体外实验对象，探讨miR-711在LPS条件下心肌细胞凋亡中的作用和靶向调控机制，以期为靶向基因改善脓毒症心肌损伤提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料 心肌细胞H9c2购自上海酶研生物细胞库；inhibitor control、miR-711 inhibitor购自广州市锐博生物科技有限公司；LPS购自上海一研生物科技有限公司；Bax抗体购自武汉艾美捷科技有限公司；Bcl-2抗体购自北京百奥莱博科技有限公司；沉默信息调节因子2相关酶6(silent information silent information regulation 2 homolog-6,SIRT6)抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology；SIRT6 siRNA、siRNA control均由吉满生物科技(上海)有限公司构建合成。

    1.2 细胞分组处理 心肌细胞分为Control、LPS、Anti-NC+LPS、Anti-miR-711+LPS组。Control组：为空白对照细胞；LPS组：细胞以25 mg/L的LPS细胞培养液培养；Anti-NC+LPS组：在细胞中转染inhibitor control，以25 mg/L的LPS细胞培养液培养；Anti-miR-711+LPS组：在细胞中转染miR-711 inhibitor ......