田军 宋铁鹰 宋春旺 户月 王虹 张在旺 王文立

    沙利度胺(Thalidomide)是一种合成谷氨酸衍生物，为非巴比妥类药物，于1957年由德国的Chemie Gruenenthal制药公司生产，作为一种镇静和止吐剂被引入市场。其针对恶心、呕吐等早孕反应的效果理想。而由于20世纪60年代出现的严重的致胎儿畸形的不良反应，而迅速被禁止使用[1]，退出市场。但最新研究发现，沙利度胺同时具备调节免疫和拮抗血管生成的作用[2]，而且，在恶性黑色素瘤、麻风结节性红斑等则显示出良好疗效，而回归市场[3-5]。同时应用于治疗骨髓增生异常综合征和多发性骨髓瘤[6,7]。而且，越来越多的关于沙利度胺作为镇痛剂或镇痛辅助剂的临床应用，被报道和进一步研究[8-10]。瞬时感受器电位(TRP)通道，是位于中枢和外周神经系统的一大类离子通道，分布广泛。它们与感知温度、有毒物质和疼痛有关。研究表明，在免疫应答和痛觉感受中TRP通道起着重要作用[11]。 TRPV1是TRPV家族中目前研究较多的成员之一，是一种人体分布较广泛的非选择性阳离子通道。早期研究发现，TRPV1在外周感觉神经系统分布广泛，近来人们认识到，TRPV1也可能存在于非神经元细胞和组织中，可被多种内源性或外源性介质激活或致敏，尤其可介导疼痛的产生和痛觉增敏[12,13]。在TRPV1被发现后的二十多年中，越来越多的证据支持(TRP)通道和生理性、病理性疼痛有关，而逐渐成为当前疼痛研究领域的热点[14,15]。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 野生型小鼠：40只雄性C57小鼠，25～28 g，购自河北医科大学实验动物中心动物合格证编号：1902095，TRPV1基因敲除小鼠：来自中国中南民族大学。所有的老鼠都被饲养于12 h的明暗交替的清洁环境中，并被允许随意获取食物和水。小鼠适应性喂养1周后，对其进行编号，利用随机数字表将小鼠分组；TRPV1基因敲除小鼠分为2组，分别为空白对照组和沙利度胺组；野生型小鼠分为2组，分别是模型组、通路抑制剂(A784168)组：每组20只，每组分为2个亚组，分别为对照组、沙利度胺组，其中每个亚组10只。小鼠正常进食水，实验前12 h，停止进食。这项研究严格按照美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)实验室动物护理和使用指南中的建议进行。本方案经石家庄市第一医院动物实验伦理委员会批准。

    1.2 人胚胎肾细胞293(HEK293)细胞培养 TRPV1通路过表达HEK293细胞，购自上海佰利公司(中国) ......