马晓莉 张艳 王雪飞

    胎盘正常发育在妊娠与胎儿发育过程中发挥重要作用，而胎盘中的主要细胞是滋养层细胞，滋养层细胞增殖、迁移可造成胎盘缺血缺氧等从而引发子痫前期等妊娠疾病[1,2]。研究表明微小RNA(microRNA，miRNA)可影响滋养层细胞迁移及侵袭能力[3]。但关于其具体作用机制尚未阐明。既往研究常采用HTR8/Svneo细胞等作为探究胎盘滋养层细胞迁移及侵袭的重要细胞模型[4]。研究表明微小RNA-573(microRNA-573，miR-573)在肺癌、宫颈癌等肿瘤中表达量降低，上调其表达可抑制肿瘤细胞增殖及侵袭[5,6]。但miR-573对滋养层细胞增殖、迁移等生物学行为的影响尚未可知。通过生物学分析显示LAIR2可能是miR-573的靶基因，研究表明LAIR2在肾细胞癌细胞表达量升高，并可能参与肾细胞癌发生及发展过程[7]。但miR-573是否可通过调控LAIR2从而影响滋养层细胞增殖、迁移及侵袭尚未可知。因此，本研究以HTR8/Svneo、JEG-3、BeWo、JAR细胞为研究模型，观察miR-573、LAIR2的表达量及其对细胞增殖、迁移及侵袭的影响，探讨其可能作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 人滋养层细胞系HTR8/Svneo、JEG-3、BeWo、JAR购自美国ATCC公司；RPMI 1640培养基、MEMα培养基、F12K培养基、杜氏改良培养基(DMEM)购自美国Gibco公司；胎牛血清购自美国HyClone公司；Lipofectamine2000与Trizol试剂购自美国Invitrogen公司；反转录试剂盒与实时荧光定量PCR试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；miR-573寡核苷酸模拟物(miR-573 mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、LAIR2小干扰RNA(si-LAIR2)、乱序无意义阴性序列(si-NC)、miR-573特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-573)及其阴性对照(anti-miR-NC)购自上海吉玛制药技术有限公司；pcDNA3.1购自武汉淼灵生物科技有限公司；甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl tetrazolium，MTT)购自北京索莱宝科技有限公司；Transwell小室购自美国Corning公司；Matrigel基质胶购自美国BD公司；兔抗人LAIR2抗体购自美国Abcam公司；兔抗人细胞周期蛋白1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2 ......