王艳春 李昶

    肺癌是一种恶性程度较高的肿瘤，是威胁人群生命健康最大的恶性肿瘤之一[1]。近几十年来许多的国家都报道肺癌的发病率和病死率均明显增高，男性肺癌发病率和病死率均占所有恶性肿瘤的第一位[2]。肺癌的发生与长期大量吸烟有着非常密切的关系，有研究表明，长期吸烟的肺癌患者比不吸烟者患上肺癌的概率是10～20倍，随着吸烟者的年龄越小，患肺癌的概率越高[3]。城市中大量的烟尘和大气中含致癌污染物，也是导致患上肺癌的因素之一，因此寻找一个有效治疗肺癌的临床治疗具有重要意义[3]。本文研究中，上调微小信使核糖核酸-564(miR-564)对非小细胞肺癌A549细胞生物学行为的影响研究，具有重要作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料 研究细胞：非小细胞肺癌A549细胞，购于上海北诺生物科技有限公司，货号l100800。本研究获得我院伦理委员会批准。主要试剂：TLR-4(上海科敏生物科技有限公司)，货号：H00007099-G01；MyD88(深圳市豪地华拓生物科技有限公司)，货号：251418；IκBα(上海江莱生物科技有限公司)；CyclinD1(武汉博欧特生物科技有限公司)，货号：orb77046；P21(北京百奥莱博科技有限公司)，货号：K23376-XGJ；MTT试剂盒(上海晶抗生物工程有限公司)，货号：JKSJ-1812；流式细胞仪(常州必达科生物科技有限公司)，货号：1026；Transwell小室(上海生博生物医药科技有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞分组处理:选取细胞分为空白组、下调组、上调组，空白组不做任何处理，对下调组、上调组细胞进行培养。取下调组、上调组2组细胞，将培养基置于37℃水槽中回温，培养基回温后喷以70%的乙醇并擦拭 ......