唐懿 刘彦麟 宋黎

    漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)属于非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)发病率最高亚型，占NHL的30%～40%，平均发病年龄在60岁左右，男性高于女性，呈B淋巴细胞弥漫性恶性增殖[1,2]。DLBCL在临床上、遗传学、形态学均表现出异质性，目前DLBCL的发病机制还未有统一定论，最新研究表明miRNAs表达水平与其发生发展和预后有关，近年来已经成为研究的热点内容[3]。人微小RNA(microRNA，miRNA)长度为21～24个核苷酸序列，能够与靶基因3’UTR配对，降解或抑制靶基因mRNA翻译，从而调控肿瘤如细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等生理过程[4]。miRNAs在肿瘤中表达失调现象也十分常见。有研究表明，miR-148a低表达与肿瘤发生发展相关，上调miR-148a表达水平能够下调c-myc表达水平，抑制肺癌细胞侵袭转移[5,6]。1型1-磷酸鞘氨醇受体(sphingosine 1-phosphate receptor1，S1PR1)属于1-磷酸鞘氨醇受体家族的G蛋白偶联受体，作为机体内重要的信号传导分子，能够与其配体1-磷酸鞘氨醇(S1P)结合从而调控下游信号通路活性[7]。研究表明，S1PR1能够调控BATF3信号通路来抑制霍奇金淋巴瘤(HL)细胞增殖，发现S1PR1作为一种癌基因，能够上调许多信号通路参与肿瘤的发生发展进程[8,9]。miR-148a和S1PR1均与肿瘤发生发展关系，且在DLBCL中未见相关报道，本研究测定miR-148a mimic转染后OCI-LY19细胞miR-148a、S1PR1及相关通路蛋白表达水平，分析二者对OCI-LY19细胞增殖和迁移的影响。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂 胎牛血清、青链霉素双抗、胰蛋白酶购自美国Hyclone公司；DMEM培养液购自北京索莱宝科技有限公司；MTT试剂购自美国Sigma公司；总RNA提取试剂盒(DP420)购自北京天根生化科技有限公司；兔抗人S1PR1、兔抗人ERK、兔抗人p-ERK、兔抗人STAT3、兔抗人p-STAT3、兔抗人PDGF-A、兔抗人PDGF-B、兔抗人BcL-XL、兔抗人McL-1、兔抗人内参U6、羊兔二抗购自美国Bioworld公司；miR-148a mimic、miR-148a阴性对照序列购自上海生工生物公司；Multiskan FC酶标仪购自美国赛默飞公司；电泳槽和转膜槽购自美国Bio-Rad公司 ......