刘慧 张虹丽 田姗

    急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)是常见的儿童恶性疾病，发病率呈增长趋势[1]。近年来，随着医疗水平的进步，尽管ALL患者5年生存率明显提高，但仍有部分患儿治疗疗效不佳[2]。目前，ALL发生发展的机制仍未阐明，深入研究影响ALL发生发展的分子机制对其治疗靶点的选择具有重要意义。微小RNA(microRNA，miRNA)是一类长度约为18～25个核苷酸的小分子单链非编码RNA，可与靶信使RNA(mRNA)的3’非翻译区(3’untranslated region，3’UTR)靶向结合，抑制靶mRNA的翻译或降解靶mRNA，从而在转录后水平调控靶基因的表达，在血液系统疾病中发挥重要作用[3]。研究显示，miR-103b在ALL患者中表达升高，可作为临床诊断该疾病的潜在分子标志物[4]。但是，miR-103b对ALL细胞增殖和凋亡的影响还未知。生物信息学软件预测显示，生长抑制蛋白家族成员5(inhibitor of growth family member 5，ING5)可能是miR-103b的靶基因。ING5基因定位于染色体2q37.3，具有抑制细胞生长并诱导细胞凋亡的作用，是一种抑癌基因。研究显示，ING5过表达可抑制胃癌[5]、甲状腺癌[6]、食管鳞状细胞癌[7]等肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为，发挥抗肿瘤作用。目前，ING5对ALL细胞增殖和凋亡的影响也还未知。本研究以急性T淋巴细胞白血病细胞Molt4为研究对象，主要探讨了miR-103b对Molt4细胞增殖和凋亡的影响及其是否通过调控ING5表达影响Molt4细胞的增殖和凋亡，以期为进一步阐明ALL发生发展的分子机制及治疗靶点的寻找提供新思路。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2016年2月至2018年10月于西安交通大学附属三二○一医院确诊并治疗的37例ALL患儿为ALL组，其中男21例，女16例；年龄3～12岁，平均年龄(7.23±2.15)岁。另选取同时期16例血小板减少症患儿为对照组，其中男9例，女7例；年龄5～10岁，平均年龄(6.89±2.57)岁。取2组患儿骨髓标本5 ml，加入等体积PBS稀释后，使用淋巴细胞分离液分离单个核细胞，预冷的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)清洗2次，-80℃保存备用。本研究经本院伦理委员会批准同意，患者家属自愿签署知情同意书。

    1.2 细胞与主要试剂 急性淋巴细胞白血病细胞Molt4(中国科学院上海细胞库) ......