易力 刘宏雷 郝增方 贾欣

    肺癌是全球最常见的癌症，是目前死亡率最高的恶性肿瘤之一，并且是我国癌症导致死亡的首要原因[1,2]。多项研究结果表明，烟草、石棉和真菌毒素等环境污染物可以促进肺癌的发生发展[3-6]。我课题组前期研究发现灌胃黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFG1)可以诱发小鼠肺部慢性炎症，最终发生肺腺癌[7]。并发现在AFG1诱导的小鼠肺腺癌标本中，炎症细胞因子TNF-α和IL-6、SOD-2和EMT及侵袭相关指标均高表达，而且已经通过体外实验证明SOD-2介导了炎症细胞因子TNF-α诱导的肺腺癌细胞EMT和迁移[8]。本文旨在揭示人肺腺癌手术标本中TNF-α-SOD2-肺腺癌增殖之间的关系及SOD-2和肺腺癌患者生存预后的关系，为临床预测预后提供新的指标。

    1 材料与方法

    1.1 材料 选取河北医科大学第二医院病理科2009年1月至2014年12月诊断的肺腺癌石蜡标本共68例为肺腺癌组，术前未经过放疗或化疗。另取20例正常肺组织作为对照组。收集患者的临床病理资料，包括年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移等，并进行电话随访完善生存时间。

    1.2 方法

    1.2.1 免疫组织化学方法:所选标本蜡块进行连续切片，厚度为 4 μm。免疫组化方法参照SP试剂盒(杭州四季青公司)，加一抗TNF-α(美国Cell Singaling公司)、SOD-2(美国Epitomics公司)、cyclinD1(美国Epitomics公司)和Survivin(美国Cell Singaling公司)，DAB试剂盒显色(购自福州迈新公司)，光学显微镜观察。

    1.2.2 免疫组化结果判读:TNF-α、SOD-2和Survivin蛋白阳性的评定标准：细胞质内可见棕黄色或棕褐色颗粒。免疫组化染色结果评判标准为：每张切片随机选取5个高倍视野(40×)，光学显微镜下观察细胞着色程度，同时计数每个高倍视野中阳性细胞数所占的百分比进行评分：①阳性细胞数≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；②细胞阳性反应强度：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，将①和②两者相乘得分结果≤4分判读为阴性，>4分判读为阳性 ......