李媛 李屹 张晔 刘永林

    阻塞性黄疸(obstructive jaundice，OJ)是指胆汁排泄受阻，胆汁不能排入十二指肠而造成胆汁淤积，引起黄疸的常见肝胆外科病症，可使肝脏受损严重，引起纤维化[1,2]。器官纤维化的发生发展与内质网应激密切相关[3,4]，内质网应激时激活PKR样内质网激酶(PKR-like ER kinase，PERK)，促进真核翻译起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor-2alpha，eIF2α)磷酸化[5]，激活下游因子转录激活因子4(activating transcription factor 4，ATF4)，从而激活C/EBP同源蛋白(C/EB phomologous protein，CHOP)[6,7]。中药海金沙为海金沙科海金沙属多年生蕨类植物，可全草入药[8]。目前对其药理活性的研究主要在抗氧化、抗菌、抗病毒、利胆、排石等方面，但作为传统中药，海金沙的功能仍有待进一步开发研究。本实验通过建立阻塞性黄疸大鼠模型，初步探究海金沙提取对阻塞性黄疸大鼠PERK/eIF2α/CHOP通路及肝纤维化的影响，为临床治疗提供可靠的理论依据和实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SD雄性大鼠，SPF级，体重200 g左右，购自辽宁省实验动物资源中心，生产许可证号为SCXK(辽)2015-0001。

    1.2 实验试剂 伊红苏木精试剂盒、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒、蛋白提取试剂盒购自上海Beyotime公司；PERK抗体、eIF2α抗体、CHOP抗体、酶联免疫试剂盒均购自英国Abcam公司。

    1.3 主要仪器 全自动生化分析仪购自美国Rayto公司；光学显微镜购自日本尼康公司；蛋白电泳仪、半干转膜仪购自美国Bio-Rad公司；凝胶成像仪购自杭州Miulab公司。

    1.4 方法

    1.4.1 海金沙的提取:参照文献[9] ......