邵春芝 陈静 王栋宇 王君

    急性肺损伤(acute lung injury，ALI)是临床上常见的危重症，脓毒症、创伤、电击和吸入有害气体等多种因素都可能导致ALI，其中脓毒症是常见的因素[1]。研究证明，严重感染后，一些患者会发生某些反应，包括促炎信号通路的激活和炎性介质的过度表达，导致全身性炎性反应，最终导致严重休克，多器官衰竭和死亡[2,3]。越来越多的证据表明，过度炎性反应和氧化应激是ALI的主要发病机制[4,5]。因此，开发预防和(或)治疗脓毒症诱导的ALI的有效方法显得尤为重要。肺泡上皮充当保护肺部免受吸入物质影响的屏障。有研究显示，肺泡上皮细胞的异常凋亡与ALI密切相关[6]。文献指出，环氧化酶-2(COX-2)是前列腺素物质合成过程中的一种限速酶，参与多种炎症性疾病，其中包括AIL[7]。因此，有效抑制肺泡上皮细胞凋亡、炎性反应及氧化应激对ALI伤的治疗至关重要。麻黄具有宣肺平喘、发汗解表等功效，常用于治疗咳喘病，麻黄碱是麻黄的主要成分。研究显示，麻黄碱能够抑制气道炎症、气道重塑以及支气管哮喘等[8,9]。目前关于麻黄碱对脓毒症性ALI的影响笔者所见尚未报道。本实验探讨麻黄碱对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡、炎症以及COX-2基因表达的影响，以期为麻黄碱用于ALI的治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人肺泡上皮细胞A549(中国科学院上海生科院细胞资源中心)；盐酸麻黄碱(中国食品药品检定研究院)；RPMI-1640培养基(美国Gibco公司)；胎牛血清(杭州四季青生物科技有限公司)；胰蛋白酶(美国Abcam公司)；CCK-8试剂(日本同仁化学研究所)；TNF-α、IL-1β和IL-6 ELISA检测试剂盒(深圳达科为生物技术有限公司)；Trizol试剂、逆转录试剂盒、SYBR Green PCR Master Mix试剂盒(日本TaKaRa公司)；ROS、MDA和SOD检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和COX-2单抗(美国Affinity Biosciences公司)；辣根过氧化酶标记的IgG二抗(美国Santa Cruz公司)；AnnexinⅤ-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物技术研究所)；ECL化学发光试剂盒(赛默飞世尔科技有限公司) ......