祁海云 王荣兰 聂伟

    宫颈癌是女性中第四大最常见的癌症，也是全世界最致命的妇科恶性肿瘤之一[1]。在全球范围内，宫颈癌的死亡率和发病率越来越高，并且已严重影响女性的健康和生命[2]。目前外科手术、放射疗法和化学疗法用于宫颈癌的治疗，但是由于大多数患者确诊时已处于晚期，治疗效果十分有限[3]。此外，放射疗法或化学疗法不仅杀伤癌细胞，而且对正常细胞也存在毒性作用。因此，这些疗法会降低治疗效果并经常引起严重的不良反应[4]。因此，迫切需要开发用于晚期宫颈癌的新型有效的治疗策略。血清和糖皮质激素调节激酶1(serum and glucocorticoid-induced kinase 1，SGK1)属于SGK家族，在多种生理病理过程中发挥作用[5]。SGK1能够调控多种信号转导途径调节细胞增殖、分化、存活和凋亡[6,7]。目前研究发现，SGK1在多种肿瘤如结直肠癌、卵巢癌和前列腺癌等中呈高表达，促进肿瘤的生长和进展[8]。然而，SGK1在宫颈癌中的功能及作用机制尚不完全明确。对与细胞增殖和凋亡相关的信号通路的研究有助于探究癌症的主要机制，从而找到预期的治疗靶点。越来越多的证据表明NF-κB信号传导途径参与了宫颈癌细胞的启动和发展[9]。因此，本实验旨在探究SGK1在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响，并初步研究其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 标本采集 组织标本选取2018年6月至2020年1月青海省妇幼保健院收治行手术治疗的宫颈癌患者，标本采集前患者均未接受化疗、放疗和激素治疗，患者经病理确诊为宫颈癌且适合手术治疗，20例标本均于全子宫切除术中取得，另取同期20例正常宫颈组织为对照。所有标本采集经患者及家属知情同意，本研究经医院伦理会批准。

    1.2 细胞株与主要试剂 人宫颈癌细胞株Caski(美国ATCC公司)；RPMI 1640培养基(美国Sigma公司)；胎牛血清(美国Invitrogen公司)；MTT试剂、NF-κB信号通路激活剂PMA(武汉博士德生物工程有限公司)；AnnexinⅤ-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(北京四正柏生物科技有限公司)；全蛋白提取试剂盒(南京凯基生物公司)；SGK1、NF-κB和IκBα单抗(美国Acbam公司)；SGK1抑制剂GSK650394、辣根过氧化物酶标记的二抗、BCA蛋白检测试剂盒、ECL化学发光试剂(碧云天生物技术研究所) ......