冯志林 李紫宣 崔大鹏 孔令霞 赵茜

    恶性肿瘤发生因素多种多样，大致可分为外源性因素和内源性因素两种。其中，起源于上皮组织的恶性肿瘤统称为癌，如胰腺癌(PC)便是其中一种常见类型。PC恶性程度很高，5年生存率1 资料与方法

    1.1 一般资料 对象纳入时间为2017年1月至2019年1月，共53例PC患者，就诊科室为肿瘤科。PC患者全部由病理切片明确诊断，纳入与排除标准均符合《胰腺癌综合诊治指南(2018年版)》[4]相关要求，且通过本院伦理委员会审核后执行。性别：男37例，女16例；年龄52～80岁，平均年龄(64.23±5.28)岁。按美国癌症联合会(Alternate Joint Communications Center，AJCC)制定的TNM及病理分期系统(第7版)评估：T1/2期15例，T3/4期38例；淋巴结转移：N0/1者：19例，N2/3者34例；病理分型：有淋巴结转移8例，无淋巴结转移45例。签署《知情同意书》和各项基础资料全部有效，课题均符合《赫尔辛基宣言》(世界医学会)中的医学研究伦理原则。

    1.2 方法

    1.2.1 主要仪器与试剂：仪器操作步骤及注意事项，试剂的操作规范、步骤及注意事项等均按具体使用说明书或根据检测师实际需求而定。仪器：微量冷冻离心机(4℃)Centrifuge 5415R Eppendorf公司；显微镜成像系统 ECLIPSE 51i 日本尼康公司；电热恒温水浴箱 HHW 21Cu 600 中国南通科学仪器厂；100 mm细胞培养皿 Coring公司；流式细胞分选仪 Facs-AriaI Beton Dickinson公司；PCR仪 TAKARA 上海皓嘉科技仪器制造有限公司；恒温磁力搅拌机 78HW-1型 杭州仪表电机厂；超净工作台 YG-875B型 苏州医疗设备厂；酶标仪 Model 550型 BIO/RAD公司；酸度计 3505型 英国JENWAY公司。试剂：RNA提取试剂盒 北京天恩泽基因科技有限公司；RIPA细胞裂解液 碧云天公司；细胞核蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒 碧云天公司；型兔抗人SPRY-2多克隆抗体 美国Proteintech公司；RT-PCR试剂盒 TransGen Biotech公司；胰蛋白酶、链霉素等 美国Sigma Chemical公司；肿瘤细胞分离提取试剂盒(DPI、LPS)Panomics公司；型兔抗人AEG-1多克隆抗体 美国Proteintech公司；胎牛血清 Hyclone公司；磷酸缓冲盐溶液(PBS)吉诺公司；普通质粒答大提试剂盒 TIANGEN公司；总RNA提取盒 BD Bioscience公司；Human MiR-21 mimics、inhibitor RiboBio公司；Human MiR-21 vector、shRNA OriGene公司 ......