尚华 刘博 赵晓东 胡宁 戚诚

    肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，根据国家癌症中心发布的数据，2014年我国肝癌新发病例 36.5万例，肝癌新死亡病例约 31.9万例[1]。肝切除术是早期肝癌的首选治疗方法，但肝癌早期诊断困难，患者就诊时多属中晚期，失去手术机会。对于不可切除的肝癌，治疗方法有局部消融治疗、经导管动脉化疗栓塞术(transarterial chemoembolization，TACE)、放射治疗和全身治疗[2]。虽然肝癌的治疗手段多样，但疗效有限，5年相对生存率仅12.1%[3]。作为抑癌基因，p53与肿瘤的发生发展密切相关，p53基因治疗制品也已在临床使用多年。本研究联合不同作用机制的治疗方式，探讨TACE联合p53基因治疗和射频消融用于肝癌治疗的可行性。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 新西兰大白兔26只，体重2.5～3.0 kg，雌雄不限，由河北医科大学动物中心提供[实验动物合格证号：SYXK(冀)2018-008]。

    1.2 材料与仪器 超液态碘油(法国Guerbet公司)，Ad-p53(深圳赛百诺基因技术有限公司)，p53抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)，射频治疗仪[安隽医疗科技(南京)有限公司]，CT机(西门子股份有限公司)，生物光学显微镜(日本电子株式会社)。

    1.3 模型建立和动物分组 VX2肿瘤株复苏后800 r/min离心5 min，去除上清液后加入 PBS 液继续离心5 min，去除上清液后再次加入PBS液，玻璃棒搅匀，取悬液进行台盼蓝染色计数，将细胞液浓度调至109个/L。随机选取2只大白兔作为肿瘤传代兔，取VX2瘤细胞悬液0.5 ml接种于兔后腿外侧肌肉内，2周后待瘤体细胞发育完成，取出瘤体，剔除肌肉组织和坏死组织，将瘤体组织剪成约 1 mm3大小的碎块浸泡于0.9%氯化钠溶液中备用。24只拟荷瘤兔全麻后无菌条件下逐层开腹，眼科剪刺破肝左叶较厚处，剪开约5 mm深度的“烧瓶样”窦道，直接植入2～3块瘤体组织，明胶海绵填埋瘘口，逐层关腹。术后3 d肌内注射青霉素105 U·kg-1·d-1预防感染。术后14 d行CT检查，观察肿瘤生长情况 ......