王乾印 高文君 丁鑫

    子宫内膜癌是女性生殖道系统常见的恶性肿瘤之一，近年的发病率呈升高趋势，严重威胁女性健康[1]。子宫内膜癌的异常增殖及恶化是其发生发展的主要原因之一，因此，寻找有效的子宫内膜癌治疗靶点具有重要意义。微小RNA(microRNA，miRNA)是一类非编码的小分子RNA，长度为18～22nt，可在转录水平上调控相关基因表达，从而参与机体多种生命活动过程，其异常表达可促进肿瘤发生[2,3]。miR-1271定位于ARL10基因的第2个内含子区域，有研究显示，多种肿瘤中miR-1271可通过抑制不同的靶基因，从而抑制肿瘤细胞生长[4-6]。子宫内膜癌中miR-1271的研究较少，有研究显示，过表达miR-1271可通过靶向抑制CDK1降低子宫内膜癌细胞增殖及诱导细胞凋亡[7]，但miR-1271对子宫内膜癌细胞侵袭迁移的影响及机制尚未明确。异粘蛋白(Metadherin，MTDH)是近年发现的一个癌基因，多种肿瘤中MTDH呈高表达，其高表达可促进肿瘤进展[8,9]。有研究显示，MTDH在子宫内膜癌中表达升高，敲除MTDH可减弱肿瘤坏死因子-α相关凋亡诱导配体(TRAIL)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂LBH589联合治疗引起的肿瘤耐药性[10]。有研究显示，miR-1271可通过调控HDAC/Wnt信号通路抑制结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力[11]。本研究以人子宫内膜癌RL95-2细胞为研究对象，旨在miR-1271靶向调节MTDH对RL95-2细胞侵袭迁移的影响，并进一步研究其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 人子宫内膜癌RL95-2细胞购自美国ATCC。DMEM培养基、胎牛血清均购自美国Hyclone公司；miR-1271 mimics及对照miR-NC、miR-1271 inhibitor及对照anti-miR-NC、MTDH siRNA及阴性对照均购自上海吉玛制药技术有限公司；LipofectamineTM 2000试剂盒、Trizol试剂均购自美国Invitrogen公司；逆转录试剂盒购自日本TaKaRa公司；Transwell小室购自美国Coming公司；E-cadherin、N-cadherin和Vimentin抗体均购自美国Abcam公司；BCA蛋白定量试剂盒购自中国碧云天生物；ECL发光液购自美国Santa cruz公司；荧光素酶报告基因检测试剂盒购自美国Promega公司；PCR仪购自美国Thermo公司 ......