封雪 王咏强 赵滨滨

    胃癌发病率和死亡率分别高居全球恶性肿瘤排行榜第四位和第二位，已成为一种全球性重大健康问题[1]。随着胃癌综合诊断和治疗手段不断进展，胃癌患者预后得到改善，但由于胃癌细胞的异常存活和恶性迁移、侵袭，胃癌患者的长期生存率仍较低[2]。手术是临床胃癌治疗重要手段之一，研究显示围手术期麻醉药的应用可能影响肿瘤细胞和免疫细胞的行为，与癌症的不良结局有关[3]。七氟醚是临床常用麻醉药之一，具有用药剂量小、对血液动力学影响轻微、苏醒快等优势。最近研究表明，七氟醚通过调节微小RNA(miRNA)表达对结直肠癌、乳腺癌、胶质瘤的增殖、迁移和侵袭具有显著抑制作用[4-6]。miR-4458是一种乳腺癌、非小细胞肺癌抑癌基因，上调miR-4458表达对癌细胞的增殖、迁移和侵袭有显著抑制作用[7,8]。异丙酚对肝癌细胞生长和转移的抑制作用亦与上调miR-4458表达有关[9]。但miR-4458在胃癌中的作用、七氟醚是否调控miR-4458表达发挥抗肿瘤作用。本研究重点探讨了七氟醚对胃癌细胞SNU-1增殖和凋亡的影响，并探讨其机制是否与调控miR-4458表达有关。

    1 材料与方法

    1.1 材料 SNU-1细胞、GES细胞购于武汉普诺赛生命科技公司；七氟醚购于上海恒瑞医药有限公司；miRNA模拟物(mimics)、抑制物(anti-miRNA)购于北京华大基因公司；四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium)MTT试剂盒、总RNA提取试剂盒、Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购于北京索莱宝生物公司；Transwell小室购于美国密理博公司；兔源β-actin(β-肌动蛋白)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、机制金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9抗体等一抗以及羊抗兔IgG二抗购于美国CST公司；miRNA逆转录试剂盒、miRNA定量PCR试剂盒购于美国GeneCopoeia公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养：SNU-1细胞采用含10%胎牛血清、1%青链霉素双抗的RPMI-1640培养基在37℃、CO2体积分数为5%的湿润培养箱中培养 ......