张雪 宦大为 刘文月

    子宫肌瘤是常见的女性生殖系统良性肿瘤，多见于30～50岁育龄期女性，绝经女性及青少年较少见[1]。子宫肌瘤占全部女性良性肿瘤的半数以上，在妇科常见病中的发病率最高[2]。子宫肌瘤虽然属于良性肿瘤，但其临床症状多样，子宫肌瘤也是常见的子宫切除的重要原因[3]。有研究显示，子宫肌瘤的发生机制复杂，遗传因素、环境等均可能与子宫肌瘤的发生有关[4]。近年来，基因在子宫肌瘤发生和发展中的作用得到广泛重视，通过探讨基因在肿瘤细胞中的作用，人为的干扰或重建肿瘤相关基因可能是子宫肌瘤治疗的途径[5]。miRNA是一类内源性的小分子RNA，其没有开放阅读框，也不具备编码蛋白质功能，其可以通过影响下游信号通路的转导发挥生物学功能[6]。人体内几乎所有细胞中均存在miRNA的表达，这些miRNA不仅参与影响细胞分化、代谢、衰老、凋亡等过程，还影响多种疾病的进展，如关节炎、糖尿病、急性肺损伤等[7]。研究表明，miRNA和肿瘤的关系密切，miRNA在肿瘤的进展中扮演重要角色[8]。既往报道显示，miR-126在乳腺癌、卵巢癌等肿瘤中表达下调，上调miR-126表达能够抑制肿瘤细胞恶性生物学行为[9,10]。在肺癌中发现，miR-126通过抑制P13K/AKT信号降低肿瘤细胞恶性生长能力[11]。P13K/AKT是一个在肿瘤中过度激活的信号通路，其可以诱导肿瘤恶性生长，抑制P13K/AKT减缓肿瘤进程[12]。本实验探讨miR-126对子宫肌瘤细胞增殖、周期和凋亡的作用和机制，为分子靶向治疗子宫肌瘤提供可能思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料 选取我院2017年1月至2018年1月收治的子宫肌瘤患者手术切除的子宫肌瘤组织以及正常子宫肌组织(距离肿瘤组织>3 cm)各51例，p-P13K抗体、p-AKT抗体购自美国Cell Signaling Technology；AKT抗体、C-Caspase-3抗体、cyclin D1抗体购自安诺伦(北京)生物科技有限公司；P13K抗体购自武汉博欧特生物科技有限公司；p21抗体购自美国Abcam；miRNA qRT-PCR试剂盒购自美国GeneCopoeia；mimics control、miR-126 mimics购自美国Thermo。

    1.2 qRT-PCR方法检测子宫肌瘤组织中miR-126表达 利用Trizol试剂分别提取子宫肌瘤组织以及正常的子宫肌组织中的RNA，RNA沉淀用DEPC水溶解，长期保存于-80℃冰箱。利用miRNA qRT-PCR试剂盒进行qRT-PCR反应 ......