张丹琦 赵滨滨 牛汉斌 刘丕弘

    宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率、死亡率较高，在世界范围内，发病率、死亡率分别位居女性肿瘤的第五位、第四位，且新发病例有逐渐年轻化的趋势，对女性健康危害极大[1]。目前宫颈癌的治疗主要以手术治疗、放射治疗、化学治疗、综合治疗等为主，在手术、放疗前给予适当化学治疗，可能提升手术效果，提高放疗敏感性，改善患者预后[2]。因此，继续深入研究宫颈癌的发展机制并探索治疗新手段仍有很大意义。环氧合酶2(cyclooxygenase 2，COX2)是前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)合成的关键酶，在肿瘤病理状态下可被诱导表达[3]。有研究发现，COX2/PGE2通路参与多种癌症的生物学过程，下调COX2、PGE2表达可以抑制大肠癌细胞增殖、侵袭能力并诱导细胞凋亡[4-6]。在宫颈癌中的研究亦表明，柚皮苷抑制宫颈癌细胞生长的机制可能与抑制COX2蛋白表达有关[7]。帕瑞昔布钠是一种高选择性COX2抑制剂，在手术术中、术后的疗效已被广泛证实，常用于肿瘤切除的手术中[8]。本研究探讨帕瑞昔布钠对宫颈癌细胞COX2/PGE2通路及增殖、凋亡、侵袭等细胞学行为的影响，以期为宫颈癌患者的临床治疗提供一定参考。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 人宫颈癌HeLa细胞(货号：ZY-H066)购自美国ATCC细胞库；胎牛血清(货号：FBS500-S)购自澳大利亚AusGeneX公司；RPMI-1640培养液(货号：GMS12052.4.1)购自美国GENMED公司；帕瑞昔布钠(货号：CY20340)购自北京凯瑞基生物科技有限公司；MTT溶液(货号：N/A-896)购自美国AMEKO公司；AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(货号：S0185)购自哈尔滨新海基因检测有限公司；Matrigel基质胶(货号：356234)购自美国BD公司；结晶紫(货号：0528-100G)购自美国Amresco公司；qRT-PCR试剂盒(货号：K1002S)购自美国Promega公司；COX2、PGE2、GAPDH引物均由上海生工生物工程股份有限公司合成；TRIzol、逆转录试剂盒(货号：15596018、AB-4366596)购自美国Invitrogen公司；BCA蛋白定量试剂盒(货号：ZYC3001)购自上海泽叶生物科技有限公司；COX2抗体、PGE2抗体、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein ......