蒋渝 张亮宇 黄薇

    重症肺炎在临床上是常见的疾病之一，是指肺部的炎症情况比较严重，可引起全身炎性反应，如果肺炎患者出现严重的低氧血症或急性呼吸衰竭则需要通气支持；或出现低血压、休克等循环衰竭表现和其他器官功能障碍可认定为重症肺炎[1,2]。常见的病因是在伴有心肺基础或附加危险因素上感染肺炎，特殊病原微生物(SARS病毒、禽流感病毒、军团菌等)感染，会增加肺炎的严重程度和死亡风险；临床主要表现有嗜睡、烦躁、呼吸衰竭、精神萎靡、血压下降等，重者会出现昏迷、惊厥、意识障碍、视盘水肿，进而出现脑疝[3]。临床常用的治疗手段为药物治疗，其中主要环节为抗感染治疗，抗生素和给药途径则需参考患者的年龄、吸入史、有无基础疾病、肺炎的严重程度等[4]。重症肺炎的原则在于重视病原学诊断和早采集呼吸道标本，查找病原体的方式有采用血培养、血清检测等途径[5]。在本研究中，主要分析miR-149-5p过表达对重症肺炎大鼠肺组织PI3K/Akt/mTOR通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 试验动物 选取45只清洁级、SPF级小鼠，雄雌各半，由希百寿药业有限公司提供[动物许可证号：SYXK(豫)2020-0001]，鼠龄3～6个月，平均鼠龄(4.5±0.75)个月；体重214～258 g，平均体重(236±11)g；小鼠均在无病原菌的干净笼子里喂养，所饮用的水和食物都要进行过高温以及高压的消毒，饲养温度维持在23℃。本实验经我院伦理委员会批准。

    1.2 主要试剂 养血琼脂糖平板(北京泰泽嘉业科技发展有限公司)；肺炎克雷伯菌(上海北诺生物科技有限公司)；酶联免疫试剂盒(上海晶抗生物工程有限公司)；恒温孵育箱(香港友诚生物科技有限公司)；胎牛血清(武汉普诺赛生命科技有限公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 建模:随机选取45只大鼠中15只作为对照组，其余大鼠参照吴萍等[6]研究实验中重症肺炎模型建立方法建立重症肺炎大鼠模型，模型构建前1 d，在养血琼脂糖平板上接种肺炎克雷伯菌并放置在37℃恒温培养，次日将菌落收集后并用无菌0.9%氯化钠溶液将其稀释呈1.2×1014CFU/L的混悬液。在大鼠腹腔注射40 mg/kg戊巴比妥钠溶液用于麻醉，颈部备皮消毒，在无菌环境下切开颈部皮肤使上段气管暴露 ......