赵德贞 孔超 李印虎

    胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤，具有较高的发病率和致死率[1]，严重威胁人类的生命健康。胃癌发病隐匿，多数患者确诊时已处于中晚期，错过最佳手术治疗时间[2]。探究胃癌发生发展的分子机制并寻找治疗靶点尤为重要。环状RNA(circRNA)和微小RNA(miRNA)是两类小分子非编码RNA，且二者可靶向结合，参与胃癌在内多种肿瘤的发展进程[3,4]。有报道称，circ_0092306在胃癌组织和细胞中表达上调，其促进胃癌的发展进程[5]。研究显示，miR-411在宫颈癌[6]、结肠癌[7]、肾细胞癌[8]等肿瘤中呈低表达，其作为抑癌基因参与这些肿瘤的发生发展。但目前，circ_0092306能否靶向调控miR-411影响胃癌的发生发展还未知。因此，本研究首先检测了胃癌组织和细胞系中circ_0092306和miR-411的表达，并以胃癌细胞为研究对象，观察了circ_0092306能否靶向调控miR-411影响胃癌细胞的增殖、凋亡和上皮间质转化，以期了解胃癌发生发展的机制并为其靶向治疗提供新靶点。报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集30例2016年5月至2018年12月于本院行手术治疗的胃癌患者的癌组织和癌旁组织，液氮保存。其中男21例，女9例；平均年龄(60.53±7.21)岁。依据TNM分期不同，Ⅰ期4例，Ⅱ期9例，Ⅲ期17例。纳入标准：均为首发病例；术前未进行放疗和化疗等治疗。排除标准：合并其他恶性肿瘤患者；合并肝、肾等脏器功能障碍者；合并自身免疫系统疾病患者。本研究经本院伦理委员会批准同意，患者或家属知情同意。

    1.2 细胞与试剂 正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞系(N87、HGC-27、AGS)，中国科学院上海细胞库；胎牛血清(FBS)，美国Hycolne公司；RPMI 1640培养基和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)，北京索莱宝科技有限公司；Trizol试剂和LipofectamineTM 2000试剂盒，美国Invitrogen公司；PCR引物、circ_0092306小干扰RNA(si-circ_0092306)、乱序无意义阴性序列(si-NC)、miR-411 模拟物(mimcs)、模拟对照序列(miR-NC)、miR-411抑制剂(anti-miR-411)、抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)、 circ_0092306野生型质粒(WT-circ_0092306)和突变型质粒(MUT-circ_0092306)，上海生工生物工程有限公司；逆转录试剂盒和PCR试剂盒 ......