斯日古楞 程健泽 赵伟军

    结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率随着人口老龄化及人们饮食习惯的改变逐年升高[1]。结直肠癌临床表现隐秘，多数患者确诊时已为中晚期，预后较差[2]。研究显示，结直肠癌与多基因表观遗传、转录及翻译等多层次异常变化有关[3]，探讨结直肠癌中异常表达的基因分子及其对该肿瘤发生发展的影响可为其治疗提供分子靶点。长链非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miRNA)是两类小分子非编码RNA，且lncRNA可作为竞争性内源性RNA与miRNA靶向结合，调控miRNA靶基因的表达，进而影响细胞的增殖、分化和凋亡等生命活动，与肿瘤的发生发展密切相关[4,5]。溶质载体家族16成员1的反义RNA 1(SLC16A1-AS1)是一种lncRNA，参与多种肿瘤的发展进程。例如，SLC16A1-AS1在肝细胞癌组织和细胞中的表达明显下调，过表达SLC16A1-AS1可靶向调控的miR-301b-3p/CHD5轴抑制肝细胞癌细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化过程，促进细胞凋亡，增强细胞放射敏感性[6]。但目前，SLC16A1-AS1能否影响结直肠癌的发生发展还未知。LncBase v.2生物信息学软件预测显示，SLC16A1-AS1可能靶向调控miR-450b-5p。研究显示，miR-450b-5p在结直肠组织中呈高表达，其高表达与肿瘤分化不良、TNM分期晚和预后不良呈正相关，过表达miR-450b-5p可靶向抑制SFRP2和SIAH1的表达并激活Wnt/β-Catenin信号传导促进结直肠癌细胞增殖及肿瘤生长，同时抑制细胞凋亡[7]。本研究探讨SLC16A1-AS1对Caco-2细胞的细胞周期、迁移、侵袭及凋亡的影响及能否靶向miR-450b-5p发挥作用，以期为结直肠癌的治疗提供新的分子靶点。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2017年10月至2019年3月于我院行手术治疗的33例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织。其中，男19例，女14例；平均年龄(56.49±8.24)岁。纳入标准：病理检测诊断为结直肠癌；均为首次确诊；术前未进行化疗、放疗等治疗。排除标准：合并其他恶性肿瘤患者；合并肝脏、肾等重要脏器功能障碍者；合并自身免疫疾病。本研究经医院病理委员会批准同意，患者家属自愿签署知情同意书。

    1.2 细胞与试剂 结直肠癌细胞系Caco-2，中国科学院上海细胞库；胎牛血清(FBS)，浙江天杭生物科技股份有限公司；双荧光素酶活性检测试剂盒，美国Promega公司；RPMI 1640培养基、细胞周期检测试剂盒、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒和二喹啉甲酸(BCA)蛋白检测试剂盒 ......