高丽丽 陈会娟 王玲

    随着人们生活方式的改变，结直肠癌(CRC)发病率呈迅速上升趋势，是全球范围内第四大致命恶性肿瘤[1]。目前，临床上对于早期CRC患者主要采用手术切除治疗，但大部分CRC患者在确诊时已处于晚期或发生转移失去手术机会。化疗、放疗和靶向治疗的应用显著改善了CRC患者的生存现状，但仍带来严重的副作用和不良反应。因此，寻找高效、安全、低毒的治疗方法是CRC临床研究的重要课题。石上柏为卷柏科卷柏属植物深绿卷柏的全草，具有清热解毒、抗癌、止血等功效，现广泛应用于肝炎、肺炎和风湿病等的治疗[2]。多项研究证实，石上柏对喉癌、鼻咽癌、肝癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤具有显著的抗肿瘤作用，但其对结直肠癌的防治作用鲜有报道[3-6]。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度200个核苷酸的非编码RNA，其通过在转录、转录后、染色质修饰和基因组印记水平调节基因表达，参与细胞周期、细胞分化、转移等多种生物学过程，是肿瘤治疗的重要靶标[7]。长基因间非编码RNA 02474(LINC02474)位于染色体1q41，现有研究显示结直肠癌组织LINC02474表达上调，LINC02474高表达与结直肠癌发生、发展和预后密切相关[8,9]。本研究从细胞增殖、周期分布、迁移和侵袭角度研究了石上柏在CRC中的抗肿瘤作用，并检测LINC02474表达变化，以期为开发石上柏用于防治CRC奠定理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人结直肠癌细胞Caco-2、DMEM培养基、胎牛血清、青链霉素双抗购自武汉普诺赛生命科技公司；空载体质粒(pcDNA)、LINC02474过表达质粒(pcDNA-LINC02474)购自上海生工生物公司；细胞周期检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；Transwell小室和基质胶购于美国Millipore公司；PrimeScript逆转录试剂盒、SYBR Premix Ex Taq II购于大连宝生物科技公司；兔源上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)多克隆抗体、兔源神经钙黏素(N-cadherin)多克隆抗体、兔源磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)单克隆抗体、山羊抗兔IgG二抗购于上海碧云天生物技术研究所 ......