刘春苗 孟雁欣 张志敏 杨扬 王亚男 张海娟

    脊髓肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)因脊髓前角α-运动神经元退化变性引起的一组以缓慢进行性加重肌无力、肌萎缩为主要临床特征的常染色体隐性遗传性骨骼肌疾病，继杜兴型肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)之后第二常见婴幼儿致死性骨骼肌遗传病[1,2]。研究指出 95% 因 SMN1 纯合缺失(“0+0”型)致病，5% 因SMN1复合杂合突变(“0+1”型)致病[3]。部分研究证实白种人群中存在双等位基因均为微小变异致病[4]。因此，SMN1双等位基因致病性变异作为SMA发病机制，也是诊断SMA金标准。SMN2与SMN1序列具有高度同源性且均分布在5q13.2，作为公认的SMA修饰因子，研究指出患者携带 SMN2 拷贝数越多表型越轻，尽管其与表型的相关性不完全一致，但国内外SMA管理共识中仍将SMN2 拷贝数作为 SMA 诊断的标准步骤之一[5]。全美医学遗传学会(american college of medical genetics,ACMG)早在2008年即推荐将SMA携带者/产前筛查纳入常规孕前检查项目，并建议对高风险夫妇妊娠胎儿进行产前诊断或植入前诊断(preimplantation genetic diagnosis，PGD)[6]。本研究基于SMA分子致病特征，将高效液相色谱技术(DHPLC)作为SMN1/SMN2拷贝检测手段，同时联合一代测序技术对患者序惯性进行点突变检测，以证实DHPLC联合一代测序技术在脊髓肌萎缩症携带者/产前筛查中有重要临床价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2018年1月至2019年1月因孕前筛查于石家庄市第四医院产前诊断中心就诊患者3 544例，其中男1 399例，女2 145例。签署知情同意书，抽取外周血3 ml。

    1.2 分子生物学分析

    1.2.1 DNA提取、PCR扩增：抽取3 ml外周血，天根DNA提取试剂盒获得基因组DNA，NanoDrop1000微量核苷酸蛋白多功能酶标仪(美国Gene公司)定量分析(OD260/OD280比值1.8～2.0) ......