熊涛 王慧 黄梦婷 陈铮锐

    膀胱癌是与泌尿生殖道癌症相关死亡的主要原因，也是男性治疗中最昂贵的恶性肿瘤[1]。外科手术、放射疗法和化学疗法是膀胱癌患者的主要治疗方法[2]。然而，这些推荐疗法的治疗效果仍然有限，并且在过去的几十年中，膀胱癌患者的5年总生存率一直处于较低水平，死亡率并未发生明显变化[3]。因此，迫切需要早期诊断标记和新的治疗策略来治疗膀胱癌。毛萼乙素(Eriocalyxin)是从传统中草药毛萼香茶菜(Isodon eriocalyx)提取的对映体-月桂烯二萜类化合物，具有多种功能，如抗癌和抗炎[4]。研究表明，毛萼乙素可抑制宫颈癌细胞C-33A的增殖[5]，降低乳腺癌细胞的生存能力，诱导细胞凋亡[6]。毛萼乙素可通过升高促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein，Bax)的表达，促进肝癌细胞HepG2的凋亡，从而抑制其增殖[7]。长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)氨甲酰磷酸合成酶1-内含子转录本1(carbamoyl-phosphate synthase 1 intronic transcript 1，CPS1-IT1)在上皮性卵巢癌组织和细胞中下调表达，过表达lncRNA CPS1-IT1可促进卵巢癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡[8]。lncRNA CPS1-IT1在肺癌组织中低表达，过表达lncRNA CPS1-IT1抑制肺癌细胞的增殖和侵袭[9]。lncRNA CPS1-IT1在结直肠癌组织和细胞中下调表达，可抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡[10]。但毛萼乙素和lncRNA CPS1-IT1对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响，且毛萼乙素是否通过调控lncRNA CPS1-IT1的表达影响膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭能力，目前仍然未知。本研究探讨毛萼乙素在膀胱癌细胞增殖和转移行为中的作用，并结合lncRNA CPS1-IT1评估其在膀胱癌中的生物学调控机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料 膀胱癌细胞株T24(美国典型培养物保藏中心ATCC)，毛萼乙素、二甲基亚砜(Dimethyl sulphoxide，DMSO)(上海源叶生物)，lncRNA DNA-CPS1-IT1过表达质粒pcDNA-CPS1-IT1、空载质粒pcDNA、LipofectamineTM2000(美国Invitrogen)，针对lncRNA DNA-CPS1-IT1小干扰RNA si-CPS1-IT1、其阴性对照si-NC、Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM培养基)、TRIzol试剂(美国Thermo Fisher Scientific) ......