刘聪 高丽洁 王淑芳 钱安平

    食管癌是全球第八大常见恶性肿瘤类型，是癌症相关死亡的第六大原因，世界卫生组织癌症统计数据显示，全球食管癌年新增病例达33万例，死亡病例高达27万例[1]。我国是食管癌高发国家之一，由于该病早期缺乏典型症状、特异性症状以及有效的早期诊断方法，多数患者在确诊时往往处于中晚期，且综合治疗后5年存活率200 bp的非蛋白转录本RNA，通过表观遗传学修饰、转录调节、miRNA调控等多种方式参与包括细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成和放化疗抵抗等在内的癌症各个生物学过程[3-5]。lncRNA同源盒基因C13反义RNA(HOXC13-AS)位于12q13.13，乳腺癌、鼻咽癌中HOXC13-AS表达增加，对肿瘤发生发展起促进作用[6,7]。然而，HOXC13-AS在HOXC13-AS在食管癌中的生物学作用和潜在机制尚不清楚。本研究通过检测食管癌组织中HOXC13-AS的水平，探讨干扰HOXC13-AS表达对食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡影响，分析其下游靶miRNA，以期为食管癌治疗提供有效靶点。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞与试剂:Eca-109细胞购自中国科学院上海细胞研究所；逆转录试剂盒、SYBR Green PCR Master Mix购于大连宝生物公司；小干扰RNA(si-RNA)及其阴性对照(si-NC)、miRNA抑制物(anti-miR-204-5p)及其阴性对照(anti-miR-NC)购自上海生工公司；膜联蛋白V(Annexin-V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒购自北京索莱宝公司；兔源磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)抗体、半胱氨酸蛋白酶3前体(pro-caspase3)、裂解的caspase3(Cleaved-caspase3)、羊抗兔IgG抗体购于上海艾博抗生物公司

    1.1.2 组织来源:选取2017年1月至2018年1月于我院进行确诊和手术切除的31例食管癌组织标本及其癌旁组织标本 ......