杨丹芬 康睿 谢圆媛 姜鹏飞

    哮喘是一种以气道慢性炎症为特征的异质性疾病，临床表现为严重的气促、咳嗽、胸闷和呼吸时有喘息声，其症状可能随着时间和强度的不同而变化[1]。气道炎症是导致哮喘临床症状发生的重要原因，可存在于哮喘的所有时段，与疾病的严重程度密切相关[2]。研究发现，Toll样受体4(toll-like receptor 4，TLR4)/核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB，NF-κB)通路能够激活炎性因子作用于气道上皮细胞，引起气道炎症、气道高反应性等症状，在哮喘的发生、发展及预后转归中起到重要作用[3,4]。柴胡皂苷d(saikosaponin-d，SSd)是从柴胡中提取纯化的主要生物活性成分之一，用于治疗炎症、感染性疾病和血管疾病，或作为保肝、抗菌或抗病毒药物[5]。有研究发现，SSd可以显著减轻四氯化碳引起的急性肝损伤，其机制可能是抑制肝组织中白介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β)和白介素-18等引起的炎症级联反应有关[6]。本研究通过建立哮喘小鼠模型，探讨SSd对哮喘小鼠气道炎症及TLR4/NF-κB通路的影响，以期为临床防治哮喘筛选新的治疗药物。

    1 材料与方法

    1.1 动物 健康雌性BALB/c小鼠40只，6～8周龄，体重(18±2.0)g，由哈尔滨医科大学动物实验中心提供，动物合格证号：P00102008，动物使用许可证号：SYXK(黑)2018-033，自由饮水，通风换气8次/h，其他均依照实验动物饲养规则喂养。

    1.2 药品 卵清蛋白(ovalbumin，OVA)美国Sigma公司，阿奇霉素(Azithromycin，AZM)(东北制药集团沈阳一厂生产，批号191008，0.25 g/支)；SSd(麦克林公司，CAS号：20874-52-6，批号：2018 MK-24)；兔抗人TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、IL-1β一抗(货号ab211573、ab188183、ab215188、ab197447，英国Abcam公司)；羊抗兔IgG EnVison 二抗(货号：7074P2，美国CST公司)；Trizol试剂(货号15596026，美国Invitrogen公司)；荧光定量试剂盒(货号RR036A，大连TaKaRa公司)；BCA试剂盒(货号A53225，美国赛默飞公司)；考马斯亮蓝试剂盒(货号B8226，美国APExBIO公司)。引物由南京金斯瑞生物公司合成提供 ......