王晓元 沈海丽 王鑫 张莉 朱蓉 熊咏民

    骨关节炎是一种常见的慢性退行性关节疾病，与软骨及其周围组织有关，临床表现为进行性关节疼痛、僵硬及功能障碍等，长期易导致严重的残疾，给患者生活带来极大不便，严重影响患者身心健康[1]。软骨细胞是关节软骨内的唯一细胞，参与细胞外基质降解、合成过程，其异常会导致外基质稳态失衡，最终导致关节功能丧失[2]。Toll样受体4(toll-like receptor 4，TLR4)是天然免疫受体，与相应配体作用后，通过激活核因子κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)通路调控白细胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-6、IL-8等多种炎性因子的产生与释放[3]。研究表明，TLR4/NF-κB通路在软骨细胞炎症损伤过程中发挥重要作用[4]。唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9(sialic acid-binding Ig-like lectin 9，Siglec-9)能够调节多种免疫细胞的功能，是炎症相关疾病的重要调控分子，能够通过抑制NF-κB途径减轻肠道炎症[5,6]。但Siglec-9对关节软骨细胞炎症损伤的作用目前尚无相关研究。本研究将通过使用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)诱导关节软骨细胞发生炎症损伤，研究Siglec-9对该过程的影响并探索涉及到的相关机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 人关节软骨细胞(货号：CP-H096)购自武汉益普生物科技有限公司；DMEM-F12培养基(货号：DXT-C11330500BT)购自美国invitrogen公司；胎牛血清(货号：FBS500-S)购自澳大利亚AusGeneX公司；TNF-α(货号：CYT-252)购自以色列prospec公司；Siglec-9(货号：ATMP01933HU)购自武汉益普生物科技有限公司；MTT溶液(货号：N/A-896)购自美国AMEKO公司；AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(货号：S0185)购自哈尔滨新海基因检测有限公司；人IL-1β、IL-6和IL-8酶联免疫(enzyme-linked immunosorbent assay ......