高卫华 周学锋 宋炜 宋梦

    糖尿病肾病作为肾内科常见的系统疾病，多发于糖尿病患者，主要受遗传、高血糖造成的代谢异常等影响，是导致终末期肾脏病的主要原因[1,2]。由于糖尿病肾病的发病机制较为复杂，且当前以控制血糖及血压、饮食等综合治疗为主，因此，有效治疗方式是当前医学的重点难点[3]。氧化应激、炎性反应等因素与糖尿病肾病的发病密切相关，炎性反与免疫系统激活在糖尿病肾病发病机制中相互影响，并促进糖尿病肾病的发生和发展[4]。利拉鲁肽在抑制胰高血糖素分泌方面具有重要的作用，广泛用于治疗2型糖尿病[5]，有研究发现，利拉鲁肽可以抑制糖尿病肾病患者的氧化应激和炎性反应，改善胰岛素的分泌[6]。杨青平等[7]研究显示，利拉鲁肽可以减缓高糖诱导的足细胞损伤，起作用机制可能与下调Grem1 mRNA，上调Nephrin表达有关。miRNA在糖尿病肾病研究密切相关，如miR-15b-5p在高糖诱导的足细胞中表达下调，过表达miR-15b-5p可以减缓高糖诱导足细胞凋亡、氧化应激和炎性反应[8]。本研究通过体外培养足细胞MPC-5，探讨利拉鲁肽是否可以调控miR-15b-5p的表达影响高糖诱导足细胞的氧化应激、炎性反应和免疫功能。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 小鼠肾足细胞MPC-5购买于武汉华联生物公司；胎牛血清、RPMI-1640培养基购买于美国Gibco公司；γ干扰素、葡萄糖购买于美国sigma公司；利拉鲁肽注射液购买于中国诺和诺德制药公司，国药准字：J20160037，规格：3 ml/18 mg；anti-miR-NC、anti-miR-15b-5p购买于广州锐博公司；LipofectamineTM2000试剂盒、RNA提取试剂盒购买于美国Invitrogen公司；MTT试剂盒购买于北京索莱宝公司；SOD试剂盒、MDA试剂盒购买于上海碧云天公司；TNF-α试剂盒、IL-6试剂盒、IL-1β试剂盒购买于南京建成生物研究中心；TGF-β1抗体、IL-2抗体、GAPDH抗体购买于英国Abcam公司；HRP标记的IgG购买于武汉博士德公司；逆转录试剂盒、荧光定量试剂盒购买于日本TaKaRa公司 ......