李宁 陈瑾 张录民

    肺癌是最常见和最致命的恶性肿瘤之一，目前肺癌的诊断策略仍然难以在早期识别出该疾病[1]。因此，需要进一步的研究来探索新颖的诊断和治疗生物标志物，并揭示肺癌进展的详细潜在机制。环状RNA(circular RNA，circRNA)是一种新型的非编码RNA，由没有自由末端的共价闭环结构形成[2]。由于高通量测序的进展，已发现多种circRNA在肺癌等癌症中呈现异常表达，这些circRNA可能对肺癌的早期诊断和治疗产生广泛影响[3,4]。circRNA主要依靠微小RNA(micro RNA，miRNA)海绵发挥其生物学功能[5]。在肺癌中，人们已经认识到一些circRNA，例如CircRNA CDR1as[6]和circRNA_102179[7]起着竞争性内源性RNA(competitive endogenous RNA，ceRNA)的作用，以减轻对miRNA靶标的抑制作用。circ_0008035是一种新鉴定的在胃癌中上调的circRNA，通过靶向miR-375/YBX1轴促进胃癌的发生[8]，但circ_0008035在肺癌中的功能和机制仍然未知。本研究通过生物学预测发现，circ_0008035与miR-188-3p存在互补位点，miR-188-3p与高迁移率族蛋白B2(high-mobility group protein B2，HMGB2)具有靶向结合位点。miR-188-3p过表达可以抑制非小细胞肺癌进展[9]，敲减HMGB2可抑制肺腺癌细胞的增殖[10]。然而，miR-188-3p和HMGB2是否涉及肺癌中circ_0008035的功能尚不确定。因此，本研究探讨circ_0008035在肺癌中的表达和对肺癌细胞增殖、凋亡的影响，结合miR-188-3p/HMGB2探讨circ_0008035的分子机制。

    1 材料与方法

    1 标本 2017年月3至2019年11月首都医科大学附属复兴医院和吉林省人民医院招募25例未接受化学疗法或放射疗法的肺癌患者，患者均知情且同意参加研究，本研究得到医院伦理委员会的批准。手术过程中收集患者的肺癌组织和癌旁组织，并保存在-80℃下直至分离RNA。

    1.2 细胞与试剂 肺癌A549细胞(美国ATCC)，circ_0008035干扰物(si-circ_0008035)、干扰物阴性对照si-NC、miR-188-3p mimics、miR-188-3p inhibitors(anti-miR-188-3p)、mimics阴性对照(miR-NC)(上海Gene Pharma) ......