林方梁 张杰 曾丽霞 杨正涛 王东

    口腔鳞癌是临床口腔科常见的恶性肿瘤之一，其发病率与死亡率呈逐年升高的趋势。临床主要采用手术、放疗、化疗等方式进行治疗，但有数据显示口腔鳞癌患者复发率较高且生存率较低[1,2]。靶向治疗方法开辟了口腔癌治疗的新途径[3]。有研究报道longnon-codingRNA，lncRNA和微小RNA(microRNA，miRNA)均参与调控口腔鳞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等多种生物学过程，可将其作为口腔鳞癌早期诊断、治疗和预后的分子生物学标志[4-7]。但lncRNAFOXD2-AS1是否可通过调控miR-1299表达从而影响口腔鳞癌细胞增殖及凋亡，目前笔者查阅文献后发现仍尚未可知。因此本实验研究lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-1299调控口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究，为揭示口腔鳞癌发生及发展的分子机制奠定理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 口腔鳞癌细胞CAL27、SCC-090、HSC-3购自上海冠导生物工程有限公司；正常人口腔角质细胞NHOK购自上海宾穗生物科技有限公司；qPCR试剂盒购自上海康朗生物科技有限公司；CCK-8试剂盒购自杭州仟诺生物科技有限公司；BCA试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；Transwell小室、Matrigel胶购自美国BD公司；AnnexinV-FITC/PI试剂盒购自北京博尔迈生物技术有限公司。

    1.2 细胞处理与分组 人口腔鳞癌细胞株CAL27、SCC-090、HSC-3和正常人口腔角质细胞NHOK在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中培养，条件37℃、5% CO2；取对数生长期细胞CAL27，将FOXD2-AS1干扰表达载体、FOXD2-AS1干扰对照载体、FOXD2-AS1过表达载体、FOXD2-AS1过表达对照载体、miR-1299模拟物、miR-1299模拟物对照质粒分别转染至细胞中 ......