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编号:275255
锦灯笼醇提取物通过lncRNA AK093987基因的表达对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
http://www.100md.com 2022年5月16日 河北医药 2022年第9期
试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
     黄余峰 于立江 崔丽华 陈静 孙长春 侯娟 吴志伟 王钊 杨曦

    结肠癌是最致命的癌症之一,也是最常见的饮食相关癌症[1,2]。目前,结肠癌可通过结肠切除、化学疗法、靶向疗法、激素疗法和免疫疗法治疗[3]。但这些策略仍无法满足临床需求,包括延长患者生存期,预防癌症转移和降低复发率[4]。为提高结肠癌患者存活率和改善治疗效果,需要开发和评估具有抗癌特性的新药物。锦灯笼(calyx seu fructus physalis)是茄科植物酸浆的干燥宿萼或带果实的宿萼,迄今为止,锦灯笼提取物被证明通过增殖抑制和凋亡促进来发挥对肝癌[5]、肺癌[6]的抗癌活性。然而锦灯笼对结肠癌是否存在抗肿瘤作用,目前仍不清楚。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)可以调节细胞行为,包括结肠癌[7]。既往资料表明,lncRNA AK093987在结肠癌中高表达,下调其表达不利于结肠癌细胞LoVo的增殖[8]。但lncRNA AK093987在锦灯笼调节结肠癌进展中的作用仍然未知。因此,本研究探讨锦灯笼醇提取物对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响,并通过其对结肠癌细胞中lncRNA AK093987的调控作用,旨在阐明锦灯笼醇提取物的潜在机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞 结肠癌细胞HT29获自武汉Procell公司,将其置于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中,并于37℃、5% CO2、饱和湿润的环境中培养。

    1.2 试剂 细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)、Annexin V-FITC试剂盒、RIPA裂解物(美国Sigma-Aldrich),TRIzol试剂(美国Thermo Fisher),PrimeScript RT试剂盒、SYBER Green master mix试剂盒、si-lncRNA AK093987、si-NC、pcDNA-lncRNA AK093987、pcDNA-NC(大连TaKaRa)。锦灯笼药材(干燥宿萼)粉碎过40目筛后,以1∶20的料液比加入80%乙醇,浸泡12 h后进行回流提取,时间2 h ......

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