潘彦波 张春雷 马俊 王昶

    恶性胶质瘤是临床常见的难治性中枢神经系统肿瘤，其恶性程度高、难治愈，目前靶向治疗可延长使患者的中位无进展生存期及中位总生存期[1,2]。因此，研究胶质瘤的分子机制，开发新的靶点以对胶质瘤的靶向治疗具有重要意义。研究表明，circRNA在肿瘤发生和转移中起重要作用，可抑制肿瘤发生，并可用作治疗靶标[3]。研究报道乳腺癌组织和细胞系中circ_0003645的表达明显增加，circ_0003645通过调节miR-139-3p/HMGB1轴促进乳腺癌的进展[4]。非小细胞肺癌患者组织中circ_0003645的过度表达与晚期TNM分期，阳性淋巴结浸润和不良预后有关；干扰circ_0003645表达可抑制非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为[5]。然而circ_0003645在胶质瘤中的作用，其对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制尚不清楚。研究报道miR-578上调可抑制胶质瘤细胞增殖，促进细胞凋亡[6]。在线生物学软件预测发现circ_0003645与miR-578有结合位点，但circ_0003645与miR-578的关系及circ_0003645调控miR-578影响胶质瘤进展尚不清楚。本实验旨在研究circ_0003645对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制是否与miR-578有关。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料 选取2017年1月至2020年12月我院病理科存档且已确诊脑胶质瘤的组织标本35例，其中男18例，女17例；年龄18～72岁，平均(39.7±2.1)岁。通过内减压术获得正常脑组织标本35例作为对照，其中男19例，女16例；年龄18～56岁，平均(37.4±1.2)岁。所有患者术前无放化疗史。患者均知情且同意。

    1.2 细胞与主要试剂 胶质瘤细胞株U251购自美国ATCC；RPMI-1640培养基购自美国Gibco公司；Trizol试剂、荧光定量试剂盒购自美国Progema公司；细胞计数试剂盒8(CCK-8)购自南京赛泓瑞生物科技有限公司；Transwell小室、Matrigel购自美国BD公司；蛋白提取试剂盒购自上海振誉生物科技有限公司；双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自美国AAT Bioquest公司 ......