杨少君 周乃珍 王晓霞

    动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是缺血性心血管疾病的潜在病理特征，是目前全球范围内病死率最高的疾病[1]。当巨噬细胞大量吸取来自于人体内氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein，oxLDL)时，会极大地增加巨噬细胞中的脂滴含量[2]，进而发展成为具有AS特征的巨噬源性泡沫细胞，最终形成AS[3]。避免AS的发生，减少泡沫细胞形成[4]，是目前科学家们关注的焦点。大量研究表明，自噬可参与调节AS的发生发展过程，并且抑制自噬会加速AS的发展，促进自噬则可抑制AS[5]。AMPK/mTOR通路是参与细胞自噬调节的通路[6]，已有研究证明阿托伐他汀可通过此通路激活细胞自噬，进而延缓AS进程[7]。阿昔莫司是一种烟酰类的降脂药，可参与调控心血管疾病发生，有研究发现，阿昔莫司可明显降低大鼠高脂饮食造成的血脂升高及颈动脉粥样硬化[8]。本研究通过探究阿昔莫司对oxLDL诱导泡沫细胞自噬的影响，并进一步探究AMPK/mTOR通路在此过程中的作用，为阿昔莫司治疗AS的分子机制提供新依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料 人单核细胞株THP-1购自武汉益普科技生物有限公司(货号：YCL-0233)；10%胎牛血清购自美国GEMINI(货号：900-108)；0.25%胰蛋白酶购自美国Hyclone(货号：SH30042.01B)；RPMI-1640培养基购自北京百奥莱博(货号：GL0182-LWE)；阿昔莫司购自美国NIFDC(货号：CP-100750)；氯喹购自美国MP Biomedicals(货号：0219391910)；佛波醇酯购自中国absin(货号：abs9107)；oxLDL购自上海经科(货号：JK-002)；油红O染色试剂盒购自美国Sciencell(货号：SC-0843)；LC3、P62、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、GAPDH抗体均购自中国Bioss；AMPK抑制剂Compound C购自美国Merck(货号：171260-1MG)；HRP标记山羊抗兔IgG购自中国万类生物(货号：WLA023)；聚偏氟乙烯膜(PVDF膜)购自美国Millipore(货号：IPVH00010)；ECL化学发光试剂盒购自上海碧云天(货号：P0018FM) ......