李静 杨琴 张雪峰 杨吉明 唐丹丹

    肺泡上皮细胞是肺脏结构和功能的基础，其炎性反应和凋亡在急性肺损伤的发生发展中起重要作用，抑制肺泡上皮细胞炎性反应和凋亡对急性肺损伤的治疗尤为重要。蓝莓又被称为蓝浆果、越桔等，除富含多糖、氨基酸、维生素和膳食纤维等多种营养物质丰富，还富含花色苷。蓝莓花色苷是一种天然的多酚类物质，具有抗氧化[1]、抑菌[2]、抗肿瘤[3]等生物活性。研究显示，蓝莓花色苷可通过降低对H2O2引起的血管内皮细胞氧化应激反应，减轻H2O2所致血管内皮细胞氧化损伤[4]；蓝莓花色苷可降低脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中炎性因子TNF-α、IL-1和IL-6的表达，降低大鼠神经功能缺损评分，对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥较好的保护作用[5]。然而，蓝莓花色苷能否影响肺上皮细胞损伤还未知。miR-141是一种微小RNA(miRNA)，参与调控细胞凋亡、炎性反应和氧化应激等生理或病理过程，在肿瘤[6]、肠炎[7]、糖尿病肾病[8]等多种疾病中发挥重要调控作用。有报道称，miR-141在肺炎组织及脂多糖(LPS)诱导的人胚肺成纤维细胞MRC-5中表达降低，过表达miR-141可有效提高LPS诱导的MRC-5细胞活力，并抑制细胞凋亡及IL-1β、IL-6和TNF-α炎性因子的表达，miR-141可作为肺炎治疗的分子靶标[9]。因此，本研究建立LPS诱导的人肺上皮细胞BEAS-2B损伤模型，观察了蓝莓花色苷对LPS诱导的BEAS-2B细胞炎性因子表达和细胞凋亡的影响及其能否通过调控miR-141发挥作用，以期为其用于急性肺损伤的治疗提供一定的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与试剂 BEAS-2B细胞系，武汉普诺赛生命科技有限公司；蓝莓花色苷，陕西承乾生物科技有限公司；LPS，美国Sigma公司；DMEM培养液、Annexin V-FITC/PI试剂盒和二喹啉甲酸(BCA)蛋白检测试剂盒，北京索莱宝；胎牛血清(FBS)，杭州四季青；LipofectamineTM 2000试剂盒，美国Invitrogen公司；白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)试剂盒，南京建成；miR-141模拟物(mimics)、模拟对照序列(miR-NC)、miR-141抑制剂(anti-miR-141)、抑制剂阴性对照序列(anti-miR-NC)和PCR引物 ......