陈媛媛 唐艳 李玲

    胃癌(gastric cancer，GC)是世界第五大最常见的癌症，也是全球第三大癌症死亡原因，严重威胁着人类的健康[1]。因此，研究胃癌诊断、预后和药物治疗的靶点具有重要的医学意义。越来越多的证据表明，非编码RNA(non-coding RNA，ncRNA)在胃肠道恶性肿瘤中发挥调节作用。近年来，研究人员利用高通量测序技术和生物信息学在哺乳动物细胞中发现了大量的环状RNA(circular RNA，circRNAs)，并证实其参与胃癌细胞的增殖、凋亡和迁移侵袭[2]。近期有研究报道，新发现的环状RNA SH3结构域激酶结合蛋白1(circular RNA SH3 binding protein 1，CircSHKBP1)在胃癌患者组织和血清中的表达均异常上调，并且与胃癌的恶性进展有关[3]，但是CircSHKBP1发挥促进癌症恶化的机制尚未清楚。大量研究证实，circRNA通过吸附miRNAs的方式发挥癌症发展中的调控蛋白翻译功能[4]。miR-1294在多种癌症中表达异常下调，发挥抑制癌症恶化的作用，其中包括胃癌[5,6]。但是，CircSHKBP1在胃癌中的调控作用是否与miR-1294相关联，有待进一步研究。本研究拟以胃癌细胞为研究对象，观察过表达CircSHKBP1对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响，旨在揭示其作用机制与CircSHKBP1靶向miR-1294有关，为胃癌的诊断、治疗提供新方向。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 本实验所用组织标本收集于2019年3月至2021年2月，本医院确诊并行外科手术切除的胃癌标本及其正常组织40例，其中处理T1～T2级的有12例，T3～T4级的有28例。涉及的患者及其家属全部签署知情同意书。本试验跟踪回访调查本医院确诊的90例胃癌患者的5年生存期。正常胃上皮细胞GES1、胃癌细胞MGC803、HGC27、BGC823均购自上海中国科学研究院细胞库。DMEM培养基购自北京康为世纪；胎牛血清购自杭州四季青；CCK-8试剂购自日本同仁化学研究所；胰蛋白酶均购自美国Sellect公司；LipofectamineTM3000购自大连TaKaRa公司；荧光素酶报告基因检测试剂盒购自上海艾博抗贸易有限公司；Transwell小室购自美国Corning公司；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙锭细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-fluorescein isothiocyanate ......