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编号:304350
miR-136-5p靶向P4HB抑制肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究
http://www.100md.com 2022年6月15日 河北医药 2022年第11期
荧光素酶,1材料与方法,2结果,3讨论
     李晓璐

    肾癌是我国10种最常见的癌症之一,其中90%是由肾细胞癌引起的。早期或局部的肾癌患者在接受部分或根治性肾切除术治疗后的5年生存率为92.6%[1]。但是,有近30%的肾癌患者在确诊时已发生转移,此时即使患者接受肾切除术仍会复发[2]。尽管可以使用药物来治疗转移性肾癌,但大多数患者最终仍会死亡。因此,为了获得更好的肾癌早期诊断、治疗策略,迫切需要对肾癌发生转移的机制进行更深入的探究。微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)在癌症中的作用已得到世界的普遍认可,但仍有部分新发现的miRNA在生物中的功能有待开发。miR-136-5p在多种癌症中的功能均有报道[3],但是其在肾癌中的功能研究有待丰富。脯氨酰4-羟化酶,β-多肽(Prolyl 4-hydroxylase,β-polypeptide,P4HB)是一种内质网分子伴侣蛋白,其在多种肿瘤中高表达,参与癌症的恶性进展过程和患者的不良预后[4]。但是笔者发现其在肾癌中发挥功能是否与miR-136-5p存在相关性尚未清楚。本研究将以肾癌细胞为研究对象,观察过表达miR-136-5p、P4HB对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,揭示miR-136-5p与P4HB之间的靶向关系,以期为肾癌的早期诊断、治疗提供新靶点。

    1 材料与方法

    1.1 材料 组织样本来自本院2019年1月至2021年2月行手术切除的30例肾癌患者的癌组织及正常组织。所有患者及家属签署知情同意书。正常肾细胞(HK2)、肾癌细胞(ACHN)、786-O、769-P和Caki-1细胞均购自美国菌种保藏中心;侵袭实验(Transwell)小室购自美国Corning;细胞计数试剂盒(CCK8)试剂盒购自日本同仁化学研究所;荧光素酶报告基因检测试剂盒购自美国Promega公司;流式细胞仪购自美国贝克曼公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养:HK2、ACHN、786-O、769-P和Caki-1细胞培养所用培养基为混有15%胎牛血清的DMEM培养基;环境条件为:5%CO2,95%空气 ......

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