陈静 叶晖 朱艳

    宫颈癌是最常见的侵袭性妇科癌症之一，是全球女性癌症相关死亡的重要原因[1,2]。诊断和治疗技术的进步极大改善了宫颈癌患者的治疗。然而，由于宫颈癌的高度侵袭性和转移能力，晚期癌症患者的预后仍然很差[3]。此外，缺乏有效的筛选生物标志物和技术导致宫颈癌诊断不佳[4]。因此，了解宫颈癌的发生和转移的潜在机制，并开发出新的治疗策略来治疗该病至关重要。长链非编码RNA(long noncoding RNA，LncRNA)与许多疾病有关，尤其是肿瘤[4]。LncRNA PITPNA反义RNA 1(PITPNA antisense RNA 1，PITPNA-AS1)是新发现的LncRNA，位于染色体17p13.3，在宫颈癌中高表达，并通过靶向miR-876-5p/c-MET轴调节宫颈癌的细胞周期和凋亡[5]。但LncRNA PITPNA-AS1对宫颈癌细胞迁移和侵袭的作用尚不清楚。竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA，ceRNA)理论的提出加快了人们对LncRNA的探索，LncRNA通过ceRNA调节微小RNA(MicroRNA，miRNA/miR)的表达[6]。miR-491-3p是已报道的肿瘤抑制因子，在视网膜母细胞瘤[7]、骨肉瘤[8]中低表达，并抑制视网膜母细胞瘤和骨肉瘤细胞生长和转移。本研究的生物信息学预测到LncRNA PITPNA-AS1和miR-491-3p之间存在靶向结合位点，这表明LncRNA PITPNA-AS1可能通过miR-491-3p与宫颈癌进展相关。因此，本研究LncRNA PITPNA-AS1在宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭中的功能和机制进行考察，为宫颈癌新疗法的开发提供新的启示。

    1 材料与方法

    1.1 材料 宫颈癌细胞系(HeLa、SiHa、Caski)、宫颈上皮永生化细胞H8(上海雅吉生物公司)，siRNA阴性对照(si-NC)、siRNA LncRNA PITPNA-AS1(si-LncRNA PITPNA-AS1)、miR-491-3p mimics、miR-491-3p inhibitors(anti-miR-491-3p)、mimics/inhibitors阴性对照(miR-NC/anti-miR-NC)、pcDNA、pcDNA-LncRNA PITPNA-AS1(广州RiboBio)，Revert AidTM Frist Strand cDNA试剂盒(加拿大Fermentas)，RIPA缓冲液、β-肌动蛋白(β-actin)一抗(美国Sigma-Aldrich) ......